仿生双载药纳米递释系统构建及其肿瘤热/化疗研究

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近年来,将化疗药物和光热(PTT)剂共负载于多功能纳米药物体系,通过联合治疗提高疗效已经成为肿瘤治疗领域的研究热点。然而,光热治疗的局部高温易诱导的周围正常细胞继发性或直接坏死并触发体内的炎症反应。诱发的炎症通常还与各种副作用有关,包括组织损伤、肿瘤抵抗性或癌症复发。本论文基于普鲁士蓝(PB)负载日蟾蜍他灵(CS-6)纳米颗粒的热/化疗联合研究,辅助吲哚美辛(IND)的抗炎和敏化功效,构建了一种共负载CS-6和IND的仿生双载药纳米递释系统。该系统通过仿生杂化膜赋予的体内长循环和良好的同源靶向能力,精准定位与肿瘤组织。利用肿瘤内源环境特异性物质谷胱甘肽(GSH)释放IND,其通过COX-2/PGE2通路调控实现敏化肿瘤细胞和缓解光热触发的炎症。以此,实现基于CS-6和普鲁士蓝(PB)的热/化疗疗效最大化。本文的主要研究内容如下:1、仿生双载药纳米递释系统构建及体外性能研究通过水热法合成了立方形介孔的PB纳米颗粒,物理负载化疗药物CS-6后,在表面涂覆一层聚多巴胺(PDA)。通过化学修饰,利用含有二硫键连接剂来连接IND和PDA。最后,利用仿生膜(RBC-Hela M)涂层技术进行生物伪装,构建共负载CS-6和IND的仿生双载药纳米递释系统(PCDI@M)。透射电镜、Zeta粒径、傅里叶红外变换光谱、SDS-PAGE等技术表征了PCDI@M的成功构建。体外光热实验表明递释系统经近红外激光照射后,可迅速升温近28.4℃。并且循环辐射后,升温幅度仍保持30℃左右,具备良好且稳定的光热效应。体外生物相容性实验表明了PCDI@M相比PCDI在巨噬细胞中的摄取降低约50%,且溶血凝血率均低于5%,具备强大的免疫逃避能力和血液安全性。2、仿生双载药纳米递释系统对宫颈癌的热/化疗研究体外细胞实验中,IND与低剂量的CS-6(50 n M)联合后,更加显著地缓解了炎症反应,炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌减少。此外,基于PGE2能通过抗凋亡蛋白Bcl-2促进Hela细胞增殖,CS-6/IND联合治疗的细胞毒性提升至50%以上,高于单药CS-6的细胞毒性(25%)。更重要的是,共负载两者的仿生双载药纳米递释系统PCDI@M联合光热治疗,细胞毒性保持在85%以上。同时,降低炎症因子水平TNF-α、IL-6和IL-1β至接近正常水平。体内抗肿瘤实验中,利用活体荧光成像仪系统得出PCDI@M的血液半衰期显著优于PCDI,延长了近1.5倍(10.8 h VS 4.4 h),在肿瘤的累积量提升至2倍以上。治疗结束后小鼠的肿瘤抑制率(TGI)高达95.6%,30天内未出现复发或死亡,生存期延长。同时,生化指标或病理切片均未出现异常。
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