迄今为止，仔猪白痢（Piglet White Scour）的防控尚存在许多亟待解决的问题：致病菌血清型众多，很难针对所有病原生产出有效疫苗用于预防；抗生素和化学抗菌药的大量使用，在世界范围内已经产生众多耐药菌株并广泛存在于自然环境；长时间大剂量使用抗生素和化学抗菌药不仅会增加环境污染，而且会因药残超标而危害食品安全。为了解决上述问题，人们把目光转向安全性较高且不易产生耐药性的中兽药。运用中药防治仔猪白痢具有悠久历史并积累了丰富经验，然而目前尚需解决下列问题：一是中药大多没从现代传染病学角度证明其有效性；二是未从现代药理学角度阐明中药作用机制；三是部分剂型在现代集约化饲养场使用不便。因此，研制出更加安全、有效且质量可控的中药制剂用于仔猪白痢的防控具有重要的经济和社会意义。本试验在课题组前期中药筛选、组方制剂的基础上，对所研制的中药制剂地翁颗粒进行了药效、毒理和临床学研究，旨在为其进一步临床应用奠定基础。为观察中药地翁颗粒在体外对小鼠脾淋巴细胞功能的影响，设置高（100μg/ml）、中（10μg/ml）、低（1μg/ml）3个剂量组，采用3H法进行测定地翁颗粒对刀豆蛋白A（ConA）或脂多糖（LPS）诱导脾脏淋巴细胞增殖的影响，ELISA方法检测ConA或金黄色葡萄球菌Cown株灭活菌体（SAC）刺激的脾淋巴细胞的上清液中IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、IFN-γ和TNF-α的含量。结果显示，在上述浓度范围内，地翁颗粒能够明显促进T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖；促进ConA刺激的淋巴细胞分泌INF-γ；促进SAC刺激的淋巴细胞分泌IL-6、IL-12和INF-γ，并抑制IL-10的分泌。表明地翁颗粒能够有效调节小鼠脾淋巴细胞功能，具有促进细胞免疫和体液免疫的作用。急性毒性试验及结果如下，将地翁颗粒单次给药剂量达5.0g/kg体重，不能引起小鼠死亡，未测出其半数致死量（LD50），表明该制剂为实际无毒；最大给药量试验将地翁颗粒单次给药剂量增加到8.0g/kg体重，以及24h内给药3次，累计最大给药剂量达24.0g/kg体重时，仍未出现明显的毒性反应。亚慢性毒性试验及结果如下，使用80只Wistar大鼠，分别以12.0g/kg、6.0g/kg、3.0g/kg体重剂量灌胃，每日1次，连用6周，停药后继续观察2周，结果3种剂量的地翁颗粒对受试动物的一般健康状况、体重、采食量、饮水量、血液细胞成分与生化指标、主要内脏器官的形态、组织结构和脏器系数没有不良影响。为了进一步考察地翁颗粒对猪的临床用药安全性，我们以地翁颗粒进行了靶动物安全试验，将地翁颗粒以0.2g/kg、0.6g/kg和1.0g/kg体重的剂量（相当于1倍、3倍和5倍于推荐剂量）给猪灌服，连续用药7天。结果表明，临床推荐剂量5倍以内的地翁颗粒对猪没有毒性反应，试验猪精神状态、饮食欲及粪便无异常，生长发育良好，红细胞数、血红蛋白含量、白细胞总数和分类计数以及各项血清生化指标均在正常范围内；通过观察组织切片，各脏器组织结构形态未发现有任何异常病变。以上结果表明，地翁颗粒具有较高的临床用药安全性。预备临床试验及结果如下，以21日龄离乳仔猪为实验动物，采用购自中国兽医微生物菌种保藏管理中心的猪源产肠毒素大肠杆菌CVCC196株，经口灌服加腹腔注射的感染途径，接种菌量为2.5×1010cfu/头，同时设置离乳、抓捕、注射、降低舍温至18～20℃，相对湿度达70%～80%等多重应激因素，造成了较为典型的仔猪白痢模型，为实验临床试验打下了基础。运用上述造模条件造模，进行预备临床试验，将中药制剂地翁颗粒给模型仔猪灌服，每日1次，连服5天，同时设立白龙散对照组、阴性对照组和空白对照组。结果证明，以0.2g/kg（中剂量）和0.4g/kg（高剂量）体重剂量的地翁颗粒内服，可有效治疗人工感染致发的仔猪白痢，其治愈率达到91.67%，有效率达100%，平均疗程为2.64和2.73天；服用高、中剂量地翁颗粒的病猪精神、饮食欲、粪便性状和体增重等得到较快恢复。地翁颗粒高、中剂量间没有显著差异，建议以0.2g/kg体重为临床用药推荐剂量。为了在较大范围内考察和评价地翁颗粒治疗仔猪白痢的有效性及安全性，我们进行了扩大临床试验研究，其过程及结果如下。选择黑龙江、吉林和辽宁三省部分猪场中具有典型仔猪白痢流行病学特点、临床症状，并能够从其肛门拭子分离到致病性大肠杆菌的仔猪白痢病猪133头，随机分组后分别灌服地翁颗粒和白龙散进行治疗。通过观察排便次数、粪便形态、精神、食欲等临床症状和血常规等实验室指标变化，以及给药前和给药结束5天后体重等，综合判定地翁颗粒治疗仔猪白痢的有效性及安全性。结果显示，以0.2g/kg体重剂量内服地翁颗粒，连续给药5天，可有效治疗自然发病的仔猪白痢，治愈率93.15%，有效率97.26%，平均疗程为3.02天，服用地翁颗粒能使病猪症状得道较快减轻或消失，治愈仔猪生长发育可以得到较快恢复。在本实验中，我们还对分离到的致病性大肠杆菌进行了毒力相关基因的检测，结果表明，分离到的133株致病性大肠杆菌中ETEC相关毒力基因的阳性率高达34%，K88阳性率低于K99；肠毒素基因的阳性率较低；粘附素基因和肠毒素基因检测同时呈阳性的菌株只有3（2.3%）株，其中一株关联出现肠聚集性大肠杆菌（EAEC）的基因EAE和EAST1。除ETEC毒力相关基因以外，其它种类的致病性大肠杆菌毒力基因阳性率也比较高，其中以EAST1和Pic出现的频次最多，其余依次为EAE、Stx2e。综上所述，由地锦草、白头翁和黄连配伍组方并提取加工的地翁颗粒是一种安全性很高的中兽药制剂，具有清热燥湿，泻火解毒，凉血止痢功效，可有效治疗仔猪白痢。