AM菌根化田菁中独脚金内酯互作信号分子研究

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盐胁迫可引起作物生理干旱,阻碍其正常的生长发育,引起作物减产或死亡。研究表明,田菁(Sesbania cannabina)与丛枝菌根(AM)真菌共生后其耐盐性明显增强,而植物内源激素—独脚金内酯(strigolactones,SLs)则在共生后的耐盐中起关键信号作用。为进一步探究AM菌根化田菁的耐盐机制,本文首次建立了以发芽试验为基础的田菁独脚金内酯检测方法,并利用高效液相色谱串联质谱技术(HPLC-MS-MS)对田菁独脚金内酯进行初步鉴定。随后,通过对AM菌根化田箐进行不同浓度的盐胁迫处理,分析了不同水平独脚金内酯的田菁对不同浓度盐胁迫的耐逆性,并进一步探究了独脚金内酯与信号分子H2O2及应激激素ABA的内在调节关系,旨在探索田菁幼苗接种丛枝菌根真菌后,独脚金内酯如何缓解盐胁迫及其与其他信号分子的调控机制。本研究取得的主要结果如下:1.田菁萃取物对向列当(O.cumana)与大麻列当(P.ramose)种子均能有效刺激,发芽率分别达到54%和66%,因此这两种列当种子可以用于对田菁独脚金内酯的定性及相对定量分析。试验进一步对田菁根系萃取物进行HPLC-MS-MS分析,发现母离子m/z=317,m/z=383和m/z=357能产生特征离子m/z=97,并进一步检测了不同磷浓度下三个母离子的相对丰度,初步确定田菁根系中含有独脚金内酯(m/z=317,m/z=383,m/z=357)。2.对AM菌根化田菁进行不同时间盐胁迫处理,结果发现,独脚金内酯的水平随着NaCl施用时间的延长而逐渐增加。施用NADPH氧化酶抑制剂或者H202清除剂可以显著降低独脚金内酯的含量及田菁耐盐性。同时,H202诱导的独脚金内酯的积累伴随着田菁耐盐性的变化而变化。本研究结果证实,AM真菌通过植物激素独脚金内酯提高了田菁耐盐性,且SLs的生物合成受到信号分子H202的调控。3.试验对AM菌根化田菁进行不同时间的盐胁迫,结果显示,SLs与ABA在菌根化田菁中具有相同的变化趋势。进一步探究AM菌根化田菁遭受盐胁迫后,植物激素SLs、ABA与信号分子H202的内在调控关系。结果显示,施加外源ABA可以有效提高菌根化田菁体内独脚金内酯的含量,施加ABA抑制剂钨酸钠则可以有效抑制独脚金内酯的生物合成。ABA诱导的独脚金内酯生物合成可以被过氧化氢清除剂DMTU所抑制,而ABA的含量对于DMTU则不敏感。此外,接菌田菁施加独脚金内酯抑制剂TIS108后,ABA可以促进田菁耐盐性的提高,但这种提高十分短暂,而施加钨酸钠的田菁中,外源GR24则可以长期有效的增强其耐盐性。以上结果表明,在接种丛枝菌根真菌的田菁幼苗中,ABA和H202共同介导了独脚金内酯诱导的田菁耐盐性。
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