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猪流感病毒（Swine influenza virus, SIV）是单股负链RNA病毒，属于正黏病毒科，A型流感病毒属。流感病毒有A、B、C三种型，它们均能够感染猪，引起猪流感（Swine influenza,SI）的发生。猪流感是猪的一种急性的呼吸道传染病，其特征为高热、突发、流鼻涕、精神沉郁、呼吸困难、体重下降、衰竭、咳嗽、反复发作等。目前发现的SIV至少有H1N1、H1N2、H1N7、H3N2、H2N3、H3N1、H3N6、H5N2、H4N6、H5N1和H9N2共11种不同的亚型。根据血清学、病原学以及流行病学的研究，我国发现的亚型有H9N2、H5N1、H3N2、H1N2和H1N1，以H3N2和H1N1亚型的流行及危害相对比较严重。在我国的猪群中，长期存在着这些不同亚型的流感病毒，为病毒的基因重排创造了条件，这必将对我国的养猪业和人类的公共卫生等产生潜在的威胁。国际学术界现在已经普遍认为，在人群中有流行潜力的流感病毒株可以通过猪产生。因此猪流感的影响不仅在其对于兽医流行病学的意义，更在于其所产生的深远的公共卫生意义。本研究以本实验室分离得到的A/swine/Henan/1/2010(H3N2)猪流感病毒及其全基因测序质粒和测序结果为基础，利用DNAStar5.0等软件对所要表达的HA、NA、NP、M1、M2、NS1、NS2、PA、PB1、PB2基因进行分析，采用DNAStar5.0和Primer Premier5.0软件，根据各基因主要的抗原区域设计了11对引物（针对M2基因设计了2对），通过PCR（M2基因采用的是OE-PCR）的方法分别对其进行了克隆，继而与pET-28a(+)或pET-32a(+)构建相应的重组表达载体并在大肠杆菌系统中表达，为H3N2亚型SIV亚单位疫苗的开发以及下一步单抗的特异性鉴定打下基础。采用猪流感病毒（SIV）H3N2亚型A/swine/Henan/1/2010(H3N2)毒株作为免疫原，免疫6周龄的BALB/c雌鼠，取小白鼠脾细胞与骨髓瘤细胞NS0融合，以全病毒包被酶联反应板，间接ELISA方法筛选，经过3次有限稀释法克隆，最终得到1株能稳定分泌抗H3N2单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株，命名为1C10。经检测，小鼠腹水抗体效价为1:51200；间接免疫荧光说明其能与抗原特异性结合。交叉性试验结果表明，该单抗不与H1、H5、PRRS、PCV2、PPV发生交叉反应。以H3N2的10个蛋白为抗原包被酶联反应板，间接ELISA的结果表明，该单抗特异性识别H3N2血凝素（HA）蛋白，表明原核表达的H3N2HA蛋白在复性后具有天然活性，为H3N2亚型SIV亚单位疫苗的开发打下基础；而1C10单抗的获得又为猪流感病毒快速诊断方法的建立以及对SIV进行更深入的研究奠定基础。