【摘 要】
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丙型肝炎病毒(HCV)为一单股正链RNA病毒,至少可分成12型和40多个亚型.HCV整个基因组只有一个ORF,编码一约3 010~3 033aa的蛋白前体,从N-端起依次为核心蛋白(C)、包膜蛋白(E)
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丙型肝炎病毒(HCV)为一单股正链RNA病毒,至少可分成12型和40多个亚型.HCV整个基因组只有一个ORF,编码一约3 010~3 033aa的蛋白前体,从N-端起依次为核心蛋白(C)、包膜蛋白(E)、非结构蛋白NS1-NS5.针对HCV的高度变异性及免疫特点,我们在HCV基因产物中优选了5个具有良好免疫原性的高度保守B/T细胞表位,组合成一个多表位抗原基因PCX.PCX基因以三段重复构建到原核表达载体pET-28b(+)上,得到了pET-28b-3pcx.融合了His标签的3PCX蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的目的蛋白含量占菌体总蛋白的30％以上.表达产物3PCX被人抗-HCV抗体识别.3PCX蛋白经过Ni<2+>-NTA-agarose亲和层析柱得到纯化.纯化的蛋白和完全弗式佐剂一起免疫BALB/c小鼠后,可诱导出高水平的特异性IgG抗体,并保持数月.抗体滴度可达到1:10<5>.
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