海藻酸钠—软骨细胞培养移植修复兔关节软骨缺损的实验研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangwahaha
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目的 对海藻酸纳-软骨细胞复合构建的工程化软骨进行组织形态学和超微结构观察,探讨应用工程性软骨移植修复软骨缺损的可行性。 方法 取34周龄成年新西兰兔双膝关节软骨,酶消化法得到高纯度软骨细胞,与可注射生物材料海藻酸钠(Alginate)混合,种植密度为4×106/ml,通过硅胶模型制成圆形柱状细胞盘(20ul/个),CaCl2溶液中凝胶化10min,DMEM/F12无血清培养基加20%FBS(fatal blood solution)于24孔培养板中培养。分别于2、4、6、8、10、12周取细胞盘,行HE、AB-PAS染色及免疫组化分析,测定盘中蛋白多糖含量,并作电镜切片进行投射电镜观察。同时选用成年新西兰兔28只,用电钻在兔两侧股骨内侧髁中央造成直径3.5mm、深3mm的全层软骨缺损模型,随机在缺损处植入体外培养4周的海藻酸钠-软骨细胞盘(实验组)及无细胞的海藻酸钠载体(对照组),分别于术后6、12、24、48周取材,观察软骨缺损修复情况。山而医科大学硕士学位伦文 结果软骨细胞培养4大后开始增殖,4周时达增殖高峰,盘中胶原及蛋白多糖的含量随培养时间延长逐渐增加;细胞移植组软骨缺损以透明样软骨修复为主,对照组则以纤维组织填充为主,48W时两组修复组织均有一定程度退变。 结论海藻酸钠一软骨细胞复合物体外培养可生成工程化软骨,异体移植能以透明软骨修复软骨缺损,但在一定时间后再生软骨容易发生退变。
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