烟碱型乙酰胆碱α7受体对胆管癌神经浸润的影响

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目的:探讨α7受体激动剂DMXB-A及阻滞剂芋螺毒素G对胆管癌神经浸润的调节作用,探讨其可能的机制,寻找阻断胆管癌早期发生周围神经浸润的新方法,为提高胆管癌患者手术切除率及预后提供有效的治疗途径。方法:1.胆管癌细胞QBC939及RBE细胞培养;2.应用Western Blot检测以上两种胆管癌细胞中α7受体基因表达情况;3.CHRNα7腺病毒细胞转染;4.胆管癌体外神经浸润模型的建立;5.体外模型培养液的选择;6.镜下观察胆管癌细胞粘附、浸润神经纤维的情况。共培养72小时后,统计与神经黏附的肿瘤细胞数,并对结果进行统计学处理。结果:1、通过应用Western Blot分别检测以上两种胆管癌细胞中α7受体的基因表达,得出RBE胆管癌细胞中α7受体基因相对高表达;2、α7受体基因成功转染胆管癌RBE细胞,并使其表达稳定;3、成功构建DRG/神经RBE细胞共培养体系,RBE细胞可融解穿透基质,并黏附于背根神经所发出的神经纤维生长。4、在DRG/神经胆管癌RBE细胞共培养体系中,共培养72小时后,与对照组和DMXB-A及芋螺毒素G组相比,DMXB-A可明显促进胆管癌细胞穿透基质、黏附神经,差异均有统计学意义,P值均<0.05;芋螺毒素G组与对照组相比,差异无统计学意义,P值>0.05。结论:胆管癌细胞可能表达烟碱型乙酰胆碱α7受体,其受体激动剂可促进胆管癌的神经浸润,为胆管癌神经浸润的发生、发展提供实验依据。
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