论文部分内容阅读
研究背景胃癌是消化道常见的恶性肿瘤,近年来在全球其发病率和死亡率呈逐年上升趋势,建立胃癌动物模型是对此病种进行研究的基础。目前将人类肿瘤细胞系移植到免疫缺陷的裸鼠体内所建立的人类异种移植物肿瘤模型,已经广泛用于临床前抗癌药药效的检测。但是这种模型存在很多缺点,诸如能够在小鼠体内生长且可以建立模型的肿瘤细胞系数量有限,每种肿瘤只有很少的肿瘤细胞株可以建立模型。而且肿瘤细胞移植成功率较低,肿瘤模型生物学特征与病人原发肿瘤相差悬殊,为了能更好地研究胃癌的防治及发病机制,建立稳定的、可靠的、合适的动物模型是十分必要的。研究目的1建立裸鼠荷人胃癌动物模型,为胃癌患者的个体化治疗、新药研发及其相关研究提供可靠的动物模型。2探讨肿瘤接种成功率与患者性别、年龄、肿瘤位置、临床分期的关系。3与裸鼠皮下注射细胞系所建立的胃癌模型在组织病理学上进行比较,观察两种方法所建立的模型与患者肿瘤哪种更为接近。方法:1.使用人胃癌标本建立裸鼠皮下肿瘤模型:从当地医院采集新鲜胃肿瘤标本,将瘤块修剪成约2-3mm3,然后用套管针将其注射到BALB/c裸鼠侧腹皮下。男性病人的肿瘤组织接种到雄性裸鼠皮下,女性病人的瘤块接种到雌鼠皮下。待第一代荷瘤鼠瘤块长至500mm3时,取出瘤块,一部分进行传代接种,另一部分标本浸泡于4%的多聚甲醛中固定,用于病理学检测。如此连续传代至第五代。观察每一代荷瘤鼠的活动状况、反应能力、瘤体生长情况及移植瘤组织病理学变化。2.观察移植瘤建模成功情况,计算接种成功率,用SPSS11.0统计学软件分析数据,并比较接种成功率与患者性别、年龄、肿瘤位置、临床分期的关系3.使用肿瘤细胞系建立裸鼠皮下肿瘤模型:使用胃癌细胞系BGC823、MGC803、和NCI87进行裸鼠皮下接种。观察瘤体生长情况并对瘤组织进行病理学检查。比较两种方法所建立的肿瘤动物模型,哪种更与患者肿瘤接近。结果:1共接种了56例胃癌患者的新鲜肿瘤组织标本于裸鼠皮下,其中17例接种成功,成功率为30%。成功率与患者性别、年龄、肿瘤位置、临床分期无明显关系。2肿瘤生长曲线呈直线型增长,肿瘤大小均匀。3与使用细胞系所建立的胃癌模型在病理学(H&E染色及免疫组化检测Ki-67蛋白表达)上进行比较,裸鼠荷人胃癌模型的肿瘤组织与患者肿瘤更为接近。结论:可以成功建立裸鼠荷人胃癌皮下肿瘤模型,并与人胃癌病理标本相一致,为治疗胃癌新药的研发、胃癌患者的个体化治疗及其相关研究提供可靠的动物模型。