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内质网应激能够诱导啮齿类动物和人类肝脂肪变性模型已经被报道,同时最近研究显示内质网应激在肝脂肪沉积中起重要调控作用。内质网应激激活脂肪合成的转录因子SREBP-1C水解导致脂肪合成酶的诱导表达。内质网应激与通过抑制ApoB100分泌导致VLDL的分泌受损有关联。但PI3K-Akt-mTOR信号通路通过内质网应激调控脂质代谢的作用鲜有研究。本实验通过PI3K-Akt-mTOR信号通路抑制剂LY294002、NVP-BEZ235、Rapamycin处理鹅肝细胞后用衣霉素诱导内质网应激,采用荧光定量PCR法检测基因定量,western blotting蛋白检测法,Elisa试剂盒检测法以及油红O染色法检测脂肪酸合成,脂肪酸氧化及脂质转运途径的相关指标来反映脂质代谢的变化,分析内质网应激对肝脏脂质代谢的作用以及PI3K-Akt-mTOR信号通路的介导作用,为探讨PI3K-Akt-mTOR信号通路与内质网应激在肝脏内脂质代谢作用的分子机制及其基因水平的调控提供理论依据,我们得到的研究结果如下：1.相比空白对照组用0.2μmol/L、2μmol/L、20μmol/L衣霉素处理细胞24小时,内质网应激相关基因BIP、EIF2a、ATF6、XBP1表达水平显著升高(P<0.05),内质网应激关键蛋白BIP/GRP78蛋白浓度显著升高(P<0.05),表明在鹅肝细胞衣霉素诱导内质网应激成功。2.衣霉素处理细胞引起mTORc1的mRNA的表达显著降低,PI3K和S6K的mRNA表达增加(P<0.05),对Akt1基因的mRNA表达则没有显著影响。同时PI3K、mTOR、S6K酶的活性,与对照组相比,mTOR的蛋白表达含量降低,而PI3K和S6K蛋白活性增加,表明衣霉素诱导的内质网应激可以调控PI3K和mTORcl基因。3. 用LY294002、NVP-BEZ235、Rapamycin处理鹅肝细胞降低衣霉素诱导的内质网应激相关基因BIP、EIF2a、爿TF6、XBP1的升高(P<0.05),降低内质网应激关键蛋白BIP/GRP78的蛋白浓度的升高(P<0.05),NVP-BEZ235、Rapamycin的抑制作用显著高于LY294002的作用(P<0.05),NVP-BEZ235和Rapamycin之间差异不显著,表明抑制剂LY294002、NVP-BEZ235、Rapamycin能抑制衣霉素诱导的内质网应激。4. 衣霉素处理细胞引起细胞内TG含量显著增加,细胞内VLDL含量减少,油红O染色显示细胞内脂滴颗粒增多,脂质沉积明显；基因FAS、ACCα、PPARγ、 PPARα、CPT1、 MTP、ApoB、DGAT1、DGAT2的mRNA表达量比对照组显著减少,SREBP-1表达量增加(P<0.05),其中,ACOX1基因mRNA表达量与对照组无明显差异；酶活显示相比对照组衣霉素处理细胞后FAS、CPT、MTP蛋白浓度降低(P<0.05),ACC蛋白浓度无明显差异；western blotting结果表明衣霉素抑制CPTl蛋白的蛋白表达。这些结果表明,鹅肝细胞中内质网应激能通过调节细胞内脂肪酸合成,脂肪酸氧化以及脂质转运相关基因的表达参与细胞脂质代谢。5.与单独衣霉素处理相比,LY294002、NVP-BEZ235、Rapamycin分别和衣霉素共同处理细胞后,细胞内的TG含量降低,胞外TG含量差异不显著,胞内VLDL含量增加,油红O染色显示细胞内脂滴颗粒明显减少；基因ACCa、FAS、SREBP-1、 CPT1、ACOX1、MTP、ApoB、PPARy和DGAT2的mRNA表达量降低,PPARα、DGAT1表达量增加；CPT1、MTP蛋白浓度升高,ACC蛋白浓度降低(P<0.05),FAS蛋白浓度差异不显著；western blotting结果表明CPT1蛋白表达降低；以上结果表明当通路被抑制时,能有效缓解内质网应激对脂质代谢过程的影响。