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胆汁淤积(cholestasis)是由多种原因所致的胆汁分泌或排泄障碍,导致胆汁不能正常流入十二指肠,从而反流入血液中。临床上常表现为黄疸,瘙痒,尿色深,粪色变浅或黄斑瘤等,实验室检查可有血清胆红素,碱性磷酸酶(ALP),5-核苷酸酶和γ-谷氨酰转移酶(GGT)水平升高,血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)提示有肝细胞损伤,慢性胆汁淤积常有总胆固醇水平升高。胆汁淤积( cholestasis)不是一种疾病,而是一组疾病共同的临床症状,故称为胆汁淤积综合征更为恰当。该综合征在临床上常见。随着对胆汁分泌和排泄的分子机制认识的不断深入,对胆汁淤积概念的理解也有了新的拓展。传统观念认为胆汁淤积是肝内、外梗阻因素造成胆汁形成后流动受阻,这种仅仅基于解剖学上的理解显然是不全面的。目前认为胆汁淤积是指胆汁生成障碍和(或)胆汁流动障碍。尽管对胆汁淤积性肝病分子机制的认识取得了一些进展,不同病因所致胆汁淤积的分子机制正逐步得以阐明,但胆汁淤积(尤其是肝内胆汁淤积)的治疗尚未获得根本性突破。如何从分子水平深入理解和开展胆汁淤积的药物治疗,仍是肝病学者面对的艰难课题。目的:观察都具有清热祛湿功效的三个中药复方茵陈蒿汤、茵陈五苓散与大柴胡汤对胆汁淤积性肝纤维化大鼠的药理作用及肝脏膜转运体Mrp2变化规律的研究。方法:采用肝外胆管结扎(BDL)和α-萘异硫氰酸酯(ANIT)灌胃方法诱导大鼠肝损伤,形成胆汁淤积性肝纤维化模型,以茵陈蒿汤、茵陈五苓散与大柴胡汤进行灌胃治疗,分别在造模后取四个时相点(BDL模型分别在造模后第3天,1周,2周,3周/ANIT模型于造模后第24,48,72,96小时)动态观测实验性大鼠一般情况,肝肾功能变化,肝组织病理学变化和纤维化程度以及三种中药方剂的干预的作用。结果:1.与假手术组比较,BDL模型组大鼠的体重都有不同程度的降低;肝重,脾重,肝指数,脾指数呈增高的动态变化;通过对造模后3天,1周,2周,3周的大鼠肝脏HE染色病理学形态观察和天狼星红胆染色对肝脏胶原纤维的观察,结扎3天后,汇管区已有胆管增生,至3周时增生逐渐加重;血清Alb含量持续下降;而GLO、TP含量先高后低的变化; TBil含量,GGT、ALP活性呈持续增高; ALT活性,TBA、CHE含量在造模3天后即显著增高,此后有所下降,至3周末仍高于假手术组(P<0.01,P<0.05),AST在3天后即显著增高并维持至3周末。LDH活性在造模1周时显著增高,即后有所下降;RUN含量在造模后前2周无明显改变,至第3周有所增高;CRE含量无统计学意义。2.在BDL模型中,与模型组比较,所有用药干预组体重、肝重、肝/体重比值都有所降低,但统计学无意义,脾重、脾/体重比值显著降低(P<0.05);三个用药干预组胆管样上皮细胞或小胆管明显减少,肝细胞相对变多,胶原纤维增生减少,肝组织纤维化程度减轻,尤以茵陈蒿汤组疗效明显;茵陈蒿汤组ALB含量、LDH活性增加;各药物干预组TBil、TBA含量及ALP活性均降低;茵陈蒿汤组和茵陈五苓散组TBA含量、GGT活性显著降低(P<0.01)。3.与正常组比较,ANIT模型组大鼠的体重都有不同程度的降低,,肝重,肝指数呈增高的动态变化,脾重,脾指数先增高后在造模72h时降低的动态变化;造模后24h汇管区就有胆管上皮细胞增生,少量炎性细胞浸润,72h时胆管上皮细胞增生范围增大,胶原纤维增生,96h增生的小胆管样上皮细胞开始缩小;Alb含量下降,96h接近正常水平;GLO、TP、CHE含量无明显变化; TBil、TBA含量,ALT、AST活性24h和72h时明显增高(P<0.05), 48h和96h接近正常;ALP、GGT显著增高(P<0.05),96h时接近正常;LDH活性显著下降(P<0.05),96h升高;RUN含量24h时下降,即后增高接近正常水平;CRE含量在48h,72h时增高(P<0.05),96h时恢复正常;肝组织Mrp2转运蛋白在正常组肝脏组织的Mrp2阳性表达量最多,在模型组24h、48h、72h的Mrp2的阳性表达量逐渐减少,在模型组96小时Mrp2的阳性表达量增多。4.在ANIT模型中,所有用药干预组体重,肝重显著降低,茵陈蒿汤、大柴胡汤的肝/体重比值显著降低(P<0.05),茵陈五苓散的肝/体重比值,所有用药干预组脾重也有所降低,但无统计学意义;与模型组相比,三个用药干预组胆管样上皮细胞或小胆管明显减少,肝细胞相对变多,胶原纤维增生减少,肝组织纤维化程度减轻,尤以茵陈蒿汤组疗效明显;肝组织Mrp2转运蛋白在三个用药干预组都增多,尤其是茵陈蒿汤最明显(P<0.05)。结论:1.无论是BDL模型还是ANIT模型,胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型主要病理改变有胆汁淤积、胆管上皮细胞增生、肝细胞减少、胶原增生和沉积,与新生的胆管上皮细胞关系密切。2.进一步证实了理论上成立的胆汁淤积性疾病的发病机制与多药耐药相关蛋白2(Mrp2)的表达有关。3.都具有清热祛湿功效的茵陈蒿汤,茵陈五苓散,大柴胡汤有较为显著的抗大鼠实验性肝纤维化的作用,且以茵陈蒿汤治疗效果最好,从试验结果来以方测证,胆汁淤积性疾病以热重于湿的证型为主。