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目的:旨在通过对H22移植瘤小鼠模型的建立,运用扶正抗癌方对小鼠进行灌胃的方法,采用免疫组化法检测肝癌组织及癌旁组织中VEGF和p21ras的表达,并结合扶正抗癌方对H22移植瘤小鼠全身状态及局部情况的影响,客观评价及探讨扶正抗癌方抑制肝癌侵袭转移的药物作用机制。
方法:提取15只小鼠作为空白对照组,剩余小鼠参考H22移植瘤小鼠模型造模方法,将造模成功后的小鼠按随即化原则分为4组,分别为:荷瘤对照组、替加氟组、扶正抗癌方组、扶正抗癌方+替加氟组,每组小鼠15只。各组小鼠分别给予相应实验药物灌胃,灌胃一次一日,连用14天药。第15天后所有小鼠进行处死,称取各组肝癌组织、癌旁组织胸腺及脾脏,对各组抑瘤率、胸腺指数及脾脏指数进行对比,与此同时,按各组肝癌组织及癌旁组织进行固定,采用免疫组织化学法检测各组肝癌组织及癌旁组织中VEGF和p21ras的表达。
结果:
1、替加氟组、扶正抗癌方组、扶正抗癌方+替加氟组与荷瘤对照组相比较,均可明显抑制荷瘤小鼠抑制瘤的生长(P<0.01),其抑瘤率分别为:30.36%、28.46%、42.27%,扶正抗癌方组与替加氟组之间比较无显著性差异(P>0.05)。
2、扶正抗癌方组及扶正抗癌方+替加氟组与替加氟组相比,能显著提高荷瘤小鼠的胸腺、脾脏指数(P<0.01),单纯采用扶正抗癌方组与联合用药组对小鼠的胸腺、脾脏指数相比较无显著性差异(P>0.05)。
3、替加氟组、扶正抗癌方组及扶正抗癌方+替加氟组与荷瘤对照组相比,在肝癌组织及癌旁组织中均能下调VEGF和抑制p21ras的表达(P<0.01)。在肝癌组织中,扶正抗癌方组与替加氟组比较,对VEGF和p21ras表达的影响无显著性差异(P>0.05),而在癌旁组织中,扶正抗癌方组对VEGF和p21ras表达的影响优于替加氟组(P<0.05)。扶正抗癌方+替加氟组对肝癌组织及癌旁组织中VEGF和p21ras表达的影响,与任何一组相比具有显著性差异(P<0.05)。
4、VEGF和p21ras两者在肝癌组织中的表达无相关性(X2=1.273,P>0.05)。
结论:扶正抗癌方具有一定的抑制瘤体生长的作用,其发挥抗肿瘤侵袭转移的作用与增强小鼠的免疫力,下调VEGF的表达及抑制p21ras的表达水平有关;VEGF和p21ras在肝癌组织及癌旁组织中的表达在分布上具有一致性,但统计学数据提示两者无相关性。