本实验是基于摇瓶水平上有良好效果的添加工艺,在15L发酵罐上的一个放大实验。所用菌种为经诱变得到的高产菌株,首先研究二级种子菌龄对最终发酵效价的影响,发现23h时移种的发酵罐最终效价更高。其次在发酵罐培养时发现将中后期的pH控制在6.8-7.0的范围更有利于林可霉素的合成。在林肯链霉菌的发酵过程中,添加丙氨酸可以抑制糖酵解途径中丙酮酸激酶(PK),从而提高抗生素合成的通量。研究在0h、12h和24h添加0.1g/L的丙氨酸对于林可霉素的影响,发现24h添加丙氨酸的效果最好。选取24h添加0.1g/L的丙氨酸,调控发酵过程中各项参数,使效价能够稳定地提高26%左右。三甲胺可以抑制色氨酸合成途径的关键酶,使流向酪氨酸的通量增加,从而提高林可霉素的产量。研究在24h添加0.02%的三甲胺,调控发酵过程中各项参数,使该工艺在15L发酵罐上能够稳定的放大,效价提高35%左右。本实验基于出发菌株和突变菌株在不同的蛋白点表达量的差异,以林肯链霉菌的16sRNA基因作为内参基因,研究ImbG、乙酰羟酸异构还原酶(AAIR)、葡萄糖-6磷酸脱氢酶(G6PDH)、谷氨酰氨合成酶(GS)的基因转录水平,发现突变菌株较出发菌株ImbG、AAIR、GS基因的转录水平均有不同程度的提高。以突变株作为对照,在发酵过程中添加丙氨酸,发现PK基因的转录水平降低了,lmbG和G6PDH基因表达量明显提高；添加三甲胺发现邻氨基苯甲酸合成酶(ASA)的转录水平低于对照,lmbG和G6PDH基因的转录水平有不同程度的提高。