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本课题研究了在饲料中添加非淀粉多糖酶对罗非鱼和鲤鱼的生长性能和消化率的影响及对罗非鱼消化酶、免疫等作用的机理。试验一研究了罗非鱼饵料中喷涂液体非淀粉多糖酶在水中稳定性。结果表明,添加了复合酶的饲料在投放入水中1小时之内,依然能保持较高酶活性,说明该酶制剂在水中的稳定性较好,为非淀粉多糖酶在水产动物中的应用提供了很好的前提。 试验二研究了添加非淀粉多糖酶对奥尼罗非鱼饲料养分消化率、血液生化及免疫功能的影响。试验选用体重约60克的奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus ×O.aureus)560尾,随机分成4个处理组,每组7个重复,每重复20尾奥尼罗非鱼,分别添加不同梯度水平的液体酶制剂(0、0.01%、0.02%、0.04%)。结果表明:1.奥尼罗非鱼饲料中添加非淀粉多糖酶对罗非鱼的特定生长率、饲料系数等生产性能均有显著影响(P<0.05);2.添加复合酶制剂显著提高了奥尼罗非鱼的干物质、粗蛋白、能量和某些氨基酸的消化率(P<0.05);3.添加复合酶制剂能显著提高奥尼罗非鱼鱼体成分中的粗蛋白质含量(P<0.05),0.04%组显著降低了粗灰分、钙、磷的含量(P<0.05);4.奥尼罗非鱼饲料中添加非淀粉多糖酶提高了血清总蛋白的含量,但差异不显著(P>0.05);显著降低了血清中甘油三酯、血糖和血清尿素氮的含量(P<0.05);显著提高了血液中T3和T4的含量,而胰岛素的含量变化没有规律。 试验三研究了不同温度和pH值对奥尼罗非鱼蛋白酶和淀粉酶活性的影响。结果表明,奥尼罗非鱼肝脏蛋白酶活性在相同测定条件下远远低于肠道蛋白酶活性。蛋白酶的最适温度均为55℃,最适pH均为8.0。随温度变化淀粉酶活性变化不大,在40℃时,淀粉酶活性最高。在pH5.8—6.2范围内,淀粉酶活性最高。 试验四研究了非淀粉多糖酶对罗非鱼蛋白酶、淀粉酶活性影响的研究。本研究于喂料前、喂料后1、3、5小时四个时间点,分别对非淀粉多糖酶不同添加量各组进行组织采样,综合研究了添加非淀粉多糖酶对罗非鱼肝脏、肠道(前、中后肠)蛋白酶和淀粉酶的影响。结果显示:1.蛋白酶活性分别按肝胰脏、胃、肠道依次升高;2.添加0.04%非淀粉多糖酶组罗非鱼肝胰脏、胃蛋白酶活性最大,均显著高于对照组;3.添加非淀粉多糖酶对前肠蛋白酶影响规律不一致,但总体以添加0.01%非淀粉多糖酶组最高;4.除喂后5小时采样结果外,其它时间采样检测结果均以添加0.01%非淀粉多糖酶组中后肠蛋白酶活性最高,显著高于对照组(P<0.05);5.适量添加非淀粉多糖酶对肝脏淀粉酶活性影响不大,高量添加非淀粉多糖酶(0.04%)对肝胰脏淀粉酶活性具有抑制作用;添加非淀粉多糖酶一定程度上提高了前、中后肠淀粉酶活性。 试验五研究了非淀粉多糖酶对罗非鱼肝胰脏淀粉酶活性和α-淀粉酶基因表达的影响,并克隆得到了罗非鱼α-淀粉酶的cDNA部分序列。研究与分析了添加不同水平的非淀粉多糖酶(0、0.01%、0.02%、0.04%)对罗非鱼在喂料前和喂料后5h的肝胰脏淀粉酶活性和α-淀粉酶的基因表达。结果显示,喂料前和喂料后5h分别取样检测,0.04%的酶添加量组的淀粉酶活性和α-淀粉酶mRNA表达量均显著低于其他三组(P<0.01)。从淀粉酶活性和基因表达分析都表明,适量添加非淀粉多糖酶时,罗非鱼肝胰脏淀粉酶活性和基因表达都变化不大,而当添加量较高时(0.04%)将