脂多糖对大鼠牙髓细胞ALP、BSP、DSPP表达的研究

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目的:本实验通过不同浓度的牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, Pg)脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激体外培养的牙髓细胞,检测不同时间下牙髓细胞中各种矿化相关因子(DSPP、ALP、BSP)的表达情况,研究LPS对牙髓细胞矿化能力的影响。方法:采用组织块法获得大鼠牙髓细胞,并用免疫组化方法对培养细胞进行鉴定,以含0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml和10000ng/ml牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, Pg) LPS作用牙髓细胞1、3、5d,用荧光定量反转录聚合酶链反应(实时定量PCR)检测DSPP. ALP. BSP mRNA表达的变化,采用spss17.0软件包对实验数据分别进行统计学分析。结果:镜下贴壁后的细胞形态多样,多呈成纤维样细胞形态,还有部分多角形细胞,胞浆突起。实时定量PCR结果显示:与对照组相比,1ng/ml、10ng/ml LPS组,大鼠牙髓细胞DSPP. ALP. BSP的mRNA表达增高,100ng/ml、10000ng/ml LPS组,DSPP、ALP、BSP的mRNA表达均降低;在第1、3、5d时1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml和10000ng/ml LPS组:mRNA表达逐渐减少。0.1ng/ml LPS对]mRNA的表达变化无明显差异。3种因子呈现相似的表达变化趋势。结论:低剂量PgLPS有促进牙髓细胞ALP、BSP、DSPP的表达,高剂量时抑制ALP、BSP、DSPP的表达;随着培养时间的延长,促进作用逐渐减弱,抑制作用逐渐增强。
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