单宁酶(Tannase, EC3.1.1.20)全称单宁酯酰水解酶，可以水解没食子酸单宁中的酯键和缩酚羧键，生成没食子酸和葡萄糖。单宁酶具有处理茶汤“冷后浑”、制备没食子酸酯类和改善皮革质量的用途，因此广泛应用于食品、饮料、医药和化工行业。单宁酶是一种诱导酶，可在单宁的诱导下由微生物发酵产生。茶叶梗作为一种农业副产物，不仅营养物质丰富还含有18-36%的单宁，因此，可用茶叶梗作为一种基础培养基发酵生产单宁酶。本实验以黑曲霉JMU-TS528为菌株利用茶叶梗固态发酵产单宁酶，对固态发酵条件及其酶制剂的制备工艺进行了研究。通过研究，阐明了各发酵条件对黑曲霉JMU-TS528利用茶叶梗固态发酵产单宁酶的影响，建立了单宁酶固体酶制剂制备的工艺流程并优化了过程参数，探讨了单宁酶制剂储藏稳定性的影响因素，为规模化工业生产单宁酶制剂及单宁酶的广泛应用奠定了基础。首先，采用单因素实验与响应面优化相结合的方法，对利用茶叶梗固态发酵生产单宁酶的工艺进行了优化，得到黑曲霉利用茶叶梗固态发酵产单宁酶的最佳参数条件为：盐溶液pH6.06，液固比为1.8(v/w)，培养温度28℃，接种量2mL(1×108个孢子/ml)，5.69%(w/v)的NH4Cl作为氮源，5%(w/v)的α-乳糖作为外加碳源，250mL三角瓶装量5g，培养时间96h。在优化的条件下进行单宁酶的固态发酵，酶活达到62U/gds，是优化前的5.17倍。其次，对固体酶制剂的制备工艺进行研究。利用缓冲液对发酵后的培养基进行浸提，得到的粗酶液经过滤、脱色、除菌、超滤浓缩和喷雾干燥后，即可得到单宁酶固体酶制剂。对酶制剂制备的喷雾干燥工艺进行优化，最佳参数条件为：助干剂为麦芽糊精、进风温度96℃、进料速度182mL/h、固形物含量8%，在此条件下，最大单宁酶回收率达到79.8%。根据以上工艺步骤和优化的工艺参数进行单宁酶固体酶制剂的制备，得到的单宁酶固体酶制剂酶活力达到690U/g，总回收率为77.2%。最后，对制备得到的单宁酶固体酶制剂的储藏稳定性进行考察，结果表明温度、空气和湿度对单宁酶固体酶制剂的储藏稳定性影响较大，光照对其影响不明显。在-20℃、真空、避光条件下保存90d后酶活保留率可达98.9%，酶制剂在储藏过程中表现出良好的稳定性。利用农业副产物茶叶梗固态发酵生产单宁酶，开辟了茶叶梗废弃资源再利用的新道路，从可持续发展的角度看，这一生产过程既能减少环境污染又具备经济效益。