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目的：探讨过表达线粒体融合素基因-2(mitofusin-2, Mfn-2)对人乳腺癌T47D细胞光动力治疗敏感性的影响及其可能机制,探寻光动力治疗的潜在靶点,为临床应用光动力治疗乳腺癌提供理论依据。方法：Real-time PCR检测人乳腺癌细胞系Mfn-2的mRNA表达情况；Western blotting检测人乳腺癌细胞系Mfn-2蛋白表达；脂质体2000转染pEGFP和pEGFP-Mfn-2质粒至T47D细胞；Real-time PCR和Western blotting检测转染效率。应用不同剂量光敏剂亚甲蓝处理T47D细胞,630nm波长半导体激光治疗仪照射,MTT比色法检测光动力疗法联合转染pEGFP-Mfn-2对人乳腺癌T47D细胞增殖的影响,流式细胞术测量T47D细胞凋亡及线粒体膜电位变化,荧光显微镜观察线粒体膜电位变化。激光共聚焦显微镜观察转染pEGFP-Mfn-2联合光动力治疗对线粒体超微形态结构的影响。结果：1. Real-time PCR结果显示：与正常乳腺细胞相比,Mfn-2mRNA在HCC38细胞系中高表达[(1±0.05)vs(8.82±0.26),P<0.01],而在T47D、MDA-MB-231、MCF-7及MDA-MB-435乳腺癌细胞系中均低表达[(1±0.05)vs(0.50±0.06),(0.15±0.01),(0.93±0.08),(0.14±0.01),(0.06±0.01),P<0.05]。2. Western-blotting结果显示：与正常乳腺细胞相比,Mfn-2mRNA在HCC38细胞系中高表达,而在T47D、MDA-MB-231、MCF-7及MDA-MB-435乳腺癌细胞系中均低表达。3.转染EGFP-Mfn-2至T47D细胞48h后,Real-time PCR和Western-blotting结果显示T47D细胞系可以高表达Mfn-2mRNA和蛋白[(0.48±0.07)vs(0.50±0.06),(946±41.72),P<0.05]。4.转染48h行PDT治疗后倒置显微镜细胞形态学观察,pEGFP组T47D细胞呈贴壁生长,增殖速度快,细胞饱满、胞膜完整、边界清晰；pEGFP-Mfn-2组和pEGFP+PDT组T47D细胞细胞边界变圆,胞质内出现空泡、细胞膜边界不清；pEGFP-Mfn-2+PDT治疗组细胞脱落,胞膜破裂、细胞浴解死亡5.MTT分析结果显示,pEGFP-Mfn-2转染可明显提高T47D细胞对光动力治疗的敏感性,[5μm/ml亚甲蓝,pEGFP-Mfn-2+PDT组(46.50±1.72)%vspEGFP+PDT组(59.96±1.21)%,P<0.05]。6.流式细胞术检测结果显示：与pEGFP+PDT组相比,pEGFP-Mfn-2+PDT组细胞凋亡率明显升高[5μm/m1亚甲蓝,pEGFP-Mfn-2+PDT组(81.2±2.1)%vs pEGFP+PDT组(68.8±2.6)%,P<0.05]。7.荧光显微镜显示：pEGFP组细胞状态良好,线粒体荧光探针定位于胞浆内,显示为红色荧光,胞浆着色深；转染pEGFP-Mfn-2组部分细胞胞浆荧光强度较pEGFP组稍弱；pEGFP+PDT组大部分细胞荧光强度减弱；pEGFP-Mfn-2+PDT组：大部分细胞脱落,偶见部分未脱落细胞,细胞荧光强度明显减弱。流式细胞术检测结果显示：pEGFP-Mfn-2转染联合PDT组线粒体膜电位明显降低[5μm/ml亚甲蓝,pEGFP-Mfn-2+PDT组(23.3±1.8)%vspEGFP+PDT组(1.3士0.1)%, P<0.05]。8.激光共聚焦显微镜显示：pEGFP-Mfn-2组和pEGFP+PDT组可导致线粒体融合,而pEGFP-Mfn-2+PDT组可导致线粒体崩解,完全失去其形态结构。结论：1.与正常乳腺细胞相比,Mfn-2在人乳腺癌T47D、MDA-MB-231、MCF-7及MDA-MB-435中呈低表达,而人乳腺癌HCC38三阴性乳腺癌细胞株高表达Mfn-2, Mfn-2在大部分乳腺癌细胞株中是呈低表达的。转染EGFP-Mfn-2至T47D细胞可以高表达Mfn-2mRNA和蛋白。2.亚甲蓝介导的PDT可明显抑制乳腺癌T47D细胞增殖,促进其凋亡,显著降低线粒体膜电位。3.Mfn-2基因可能成为光动力治疗的潜在靶点,其机制可能与改变线粒体形态结构,诱导线粒体途径凋亡有关。