ND-Fx的制备及其体外抗Hela细胞的研究

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纳米金刚石(Nanodiamond,NDs)具有优异的物理、化学性质、丰富可调的表面基团以及良好的生物相容性,使其在电子器件、发光材料、复合材料、催化以及生物医学等领域有着广泛的应用前景,而将其作为构建纳米载药系统的载体便是其中一项应用。本文通过机械研磨、高温退火以及表面改性的方法完成纳米金刚石的分散、表面功能化,之后连接岩藻黄素(Fucoxanthin,Fx)构建纳米载药系统ND-Fx,并研究其对Hela细胞的活性抑制作用。首先利用同步热分析测试确定高温空气氧化处理纳米金刚石的参数,即以5℃/min的速率升温至400℃,保温150 min后开始降温。经过处理后,纳米金刚石表面的sp~2碳减少,sp~3碳得以显现。然后分别使用铬酸洗液、强氧化性混合酸对纳米金刚石进行表面修饰,得到了平均粒径为91 nm,表面电势为-35.5 m V的羧基化纳米金刚石(ND-COOH),并可长期保持分散稳定性。使用氯化亚砜对ND-COOH进行表面修饰,得到反应活性更强的酰氯化纳米金刚石(ND-COCl)。分别使用ND-COOH、ND-COCl与岩藻黄素结合,构建纳米载药系统ND-Fx。通过傅里叶变换红外光谱仪、紫外可见分光光度计的表征,证明了纳米金刚石与岩藻黄素的有效结合,并对两种方法制备的ND-Fx的载药量做了计算,岩藻黄素的含量分别达到19.9%和24.42%。以ND-COCl为原料可以得到具有更高载药量的纳米载药复合粒子ND-Fx。对ND-Fx在不同p H、不同释放时间下的药物释放量进行测试,随着p H的减小,药物的释放速率增快、释放量增加,在p H为5.0的情况下,释放量可达89.62%以上。将不同浓度的NDs、岩藻黄素、ND-Fx以及纳米金刚石与岩藻黄素的混合物(ND+Fx)与Hela细胞共培养24 h后进行MTT测试。结果表明NDs对细胞的生物活性基本没有负面影响;而ND-Fx对Hela细胞的活性抑制作用相较于岩藻黄素单体,有着较为明显的增强。
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