赏食两用百合种苗快繁体系建立和营养价值评价

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百合(Lilium brownii var.viridulum)作为一种药食同源植物,富含营养成分及功能性成分,具有清热润肺、止咳平喘、抗炎抗癌等功能。百合花颜色绚丽,香味清新,可作观赏,在商业开发利用方面具有重大意义,市场前景十分广阔。赏食两用百合结合了以上两种特点于一身,其鳞茎可作食用,其花朵可作观赏。首先,本文以5种不同颜色(白色、黄色、橙黄色、紫红色和黄红复色)的赏食两用百合为材料,克隆了不同百合的18S r RNA基因序列,开展了供试材料的系统进化分析。其次,本文建立了赏食两用百合种苗快繁体系,并进一步利用16S r RNA测序对百合组培过程中出现的内生菌进行了菌种鉴定,为后期种苗增殖以及百合生物菌肥开发奠定基础;最后,通过对不同花色的赏食两用百合鳞茎的营养成分测定,为赏食两用百合健康价值挖掘奠定基础。主要研究结果如下:1、本文供试的赏食两用百合花色共有五种颜色,分别为白色、黄色、紫红色、橙黄色、黄红复色。田间生长指标测定表明,不同品种百合茎通体直立无分支,茎高存在显著差异,在39.88-71.42 cm之间。其中,白色百合株高最高,达71.42 cm。供试百合叶片为单叶,无叶柄,冠部叶片的平均叶长和叶宽分别为7.78cm和2.21cm。其中,紫红色百合冠部叶长最长,为9.22cm,白色百合冠部叶宽最宽,为3.05 cm。基部叶片的平均叶长和叶宽分别为6.28 cm和6.09 cm,其中,黄红复色叶片最窄,平均冠部、基部叶宽分别为1.37 cm和1.36 cm。花着生于茎顶端,多头簇生排列,花瓣数为6瓣,花冠较大,呈伞状,开花时间集中在5、6月间;种球鳞片为披针形,鳞片数为21.6-26.3片之间,其中黄红复色百合鳞片数最多。2、通过对5种颜色赏食两用百合的18S r RNA测序结果进行比对,发现5种赏食两用百合的18S r RNA序列变异较大,存在碱基缺失的现象。进化树分析表明,供试材料的18S r RNA序列与沼泽百合(Lilium superbum)的18S r RNA序列高度相似,一致性为69.93%。另外,白色、黄色、紫红色、黄红复色赏食两用百合亲缘关系较近,而橙黄色百合与其他四种亲缘关系较远,与沼泽百合亲缘关系较近。3、建立赏食两用百合快繁体系。本文首先优化了赏食两用百合外植体消毒方法,使用0.1%升汞和5%次氯酸钠进行消毒对比。结果显示,消毒处理10 min,0.1%升汞处理的染菌率为44.0%,5%次氯酸钠处理的染菌率为44.2%,无显著差异。但由于升汞含有毒性并且对环境有一定破坏性,因此选择次氯酸钠作为消毒试剂。其次,本文对百合不定芽诱导和增殖体系进行了优化。结果表明,当激素浓度为1.0 mg﹒L-16-BA、0.2 mg﹒L-1NAA时,百合不定芽的诱导率是最高的,白色百合不定芽诱导率高达99.11%。当激素浓度为2.0 mg﹒L-16-BA、1.0 mg﹒L-1NAA时,5种百合的不定芽增殖系数最高,适合不定芽的增殖。最后,百合不定芽诱导生根研究发现,MS培养基比1/2MS培养基更适合做百合生根的基础培养基,在激素浓度为0.3 mg﹒L-1IBA、0.5 mg﹒L-1NAA时,MS培养基中百合不定芽的平均生根率为98.89%。4、针对赏食两用百合组织培养过程当中出现的内生菌,本文开展了该内生菌的16S r RNA测序、序列比对和进化树分析。研究结果表明,该菌株与Exophiala(外瓶霉属)处于同一分支,推测为Exophiala spinifera(棘状外瓶霉)。5、本文开展5种赏食两用百合的淀粉、蛋白质、多糖、总黄酮等营养及功能成分的测定。测定结果表明,不同供试百合营养成分存在差异。其中,黄色百合的淀粉含量最高,为62.74 mg.g-1;紫红色百合的蛋白质含量最高,为212.38mg.g-1;橙黄色的多糖含量最高,为50.47 mg.g-1;黄红复色百合的总黄酮含量最高,为3.10 mg.g-1;橙黄色百合的总酚酸、总皂苷含量最高,分别为11.56 mg.g-1,2.83 mg.g-1。
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