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肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是世界上最为常见的恶性肿瘤之一，位于肿瘤死因第三位。肝炎病毒感染是我国HCC的主要病因，包括丙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HCV）和乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus,HBV）感染。而在我国的肝癌患者中约占85%-95%是因慢性HBV感染所致。HCC恶性程度高、术后高复发率和短生存期是术后预后的难题。多个研究表明HBV X基因编码的蛋白（HBx）是乙肝致癌的最主要途径，其变异体截短型HBx蛋白（Ct-HBx）与HCC的发生密切相关，但与HCC患者术后预后的关系尚不明确。因此，明确Ct-HBx蛋白的表达在乙肝病毒相关性HCC患者术后预后中的作用，为降低HCC复发率，延长患者的生存时间提供更精准的预测。
目的 探讨乙肝病毒相关性肝细胞癌患者的肝癌组织、癌旁组织和癌栓组织中Ct-HBx蛋白的表达与临床病理因素及术后预后的关系。
方法 采用常规免疫组织化学法检测肝癌患者462例癌组织、配对的263例癌旁组织和配对的25例癌栓组织中Ct-HBx蛋白的表达情况，并采用回顾性队列分析法将Ct-HBx蛋白的表达与临床病理资料进行关联分析，研究Ct-HBx蛋白的表达与HCC患者术后预后的关系。并运用SPSS 17.0软件进行统计学分析。
结果
1、Ct-HBx蛋白在肝癌组织和癌旁组织的阳性表达率分别为：45.45%（210/462）和11.79%（31/263）。Ct-HBx蛋白在263例配对的肝癌组织和癌旁组织的阳性表达率分别为：43.73%（115/263）和11.79%（31/263）。Ct-HBx蛋白在配对肝癌组织和癌栓组织的阳性表达率分别为：40%（10/25）和64%（16/25）。结果显示：Ct-HBx蛋白在肝癌组织中的阳性表达高于癌旁组织，并且具有显著性差异（P＜0.05）。
2、以复发率和生存率为因变量，临床病理因素进行单因素Cox回归模型分析，结果显示：年龄、门静脉癌栓（PVTT）、术前天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、术前丙氨酸氨基转移酶（ALT）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、术前甲胎蛋白（AFP）、肿瘤大小、主瘤旁微小子灶、癌巢内血管癌栓、肿瘤分化程度、肝硬化程度、术前巴塞罗那（BCLC）分期、术后抗病毒治疗与术后复发密切相关（P＜0.05）。性别、年龄、门静脉癌栓、术前AST、术前ALT、HBeAg、术前AFP、术前总胆红素、肿瘤大小、肿瘤包膜、主瘤旁微小子灶、癌巢内血管癌栓、肿瘤分化程度、肝硬化程度、术前BCLC分期、术后抗病毒治疗和Ct-HBx蛋白表达与术后生存密切相关(P＜0.05）。
3、多因素Cox回归模型分析采用forward: LR法进行筛选，结果显示：术后抗病毒治疗、年龄、术前AFP、术前AST、门静脉癌栓、主瘤旁微小子灶和术前BCLC 分期是肝癌患者术后复发的独立危险因素(P＜0.05)。Ct-HBx蛋白表达、术前AFP、门静脉癌栓、肿瘤包膜和术前 BCLC 分期是肝癌患者术后生存的独立危险因素(P＜0.05)。
4、462例肝癌组织和263例癌旁组织进行组间基线对比分析，结果显示：肝癌组织中Ct-HBx蛋白的表达与术前BCLC分期、术后抗病毒治疗和性别显著相关（P值分别为0.04、0.02和0.01）。癌旁组织中Ct-HBx蛋白的表达与临床病理因素均无显著相关（P＞0.05）。
5、263例配对肝癌组织和癌旁组织进行组间基线对比分析，结果显示：肝癌组织中Ct-HBx蛋白的表达与糖类抗原（CA19-9）、术后抗病毒治疗和性别显著相关（P值分别为0.04、0.04和0.01）。癌旁组织中Ct-HBx蛋白的表达与临床病理因素均无显著相关（P＞0.05）。
6、四组Ct-HBx蛋白分组表达进行组间基线对比分析，结果显示：
1)癌组织和癌旁组织均阴性表达的患者与癌组织阳性表达且癌旁组织阴性表达的患者相比，存在性别分布差异（P=0.01）；
2)癌组织和癌旁组织均阴性表达的患者与癌组织和癌旁组织均阳性表达的患者相比，HBeAg阳性率具有统计学差异（P=0.04）；
3)癌组织和癌旁组织均阳性表达的患者与癌组织阴性表达且癌旁组织阳性表达的患者相比，两组间术前HBV DNA载量具有统计学差异（P=0.02）；
4)癌组织和癌旁组织均阴性表达的患者与癌组织和癌旁组织均阳性表达、癌组织阴性表达且癌旁组织阳性表达的患者相比，肿瘤分化程度具有统计学差异（P 值分别为0.04和0.04）；
5)癌组织阳性表达且癌旁组织阴性表达的患者与癌组织阴性表达且癌旁组织阳性表达的患者相比，肿瘤分化程度具有统计学差异（P=0.04）。
6)其他分组表达与临床病理因素均无显著相关（P＞0.05）。
7、临床病理因素与预后相关性分析发现：Ct-HBx蛋白在癌旁组织中阴性表达可改善术前AFP≤200μg/L、无门静脉癌栓、无主瘤旁微小子灶、术后抗病毒治疗的患者人群的无瘤生存期（RFS)（P值均分别为0.01）。
8、分层分析发现：术后未接受抗病毒治疗组，Ct-HBx蛋白在肝癌组织中阳性表达可降低患者总体生存期（OS)（P=0.06）；不论 Ct-HBx 蛋白在癌组织中如何表达，术后抗病毒治疗均可改善RFS（P＜0.01，P=0.01)。
9、Kaplan Meier生存分析发现：Ct-HBx蛋白在癌组织阴性表达且癌旁组织阳性表达的患者与癌和癌旁组织全阴性表达的患者在 RFS 有显著性差异（P=0.05），而在OS有边缘显著性差异（P=0.06）。
结论 Ct-HBx蛋白的表达情况与术后HCC患者预后相关，Ct-HBx蛋白可以作为预测术后肿瘤复发和生存情况的有效分子标记物，其确切的机制有待于进一步研究。
目的 探讨乙肝病毒相关性肝细胞癌患者的肝癌组织、癌旁组织和癌栓组织中Ct-HBx蛋白的表达与临床病理因素及术后预后的关系。
方法 采用常规免疫组织化学法检测肝癌患者462例癌组织、配对的263例癌旁组织和配对的25例癌栓组织中Ct-HBx蛋白的表达情况，并采用回顾性队列分析法将Ct-HBx蛋白的表达与临床病理资料进行关联分析，研究Ct-HBx蛋白的表达与HCC患者术后预后的关系。并运用SPSS 17.0软件进行统计学分析。
结果
1、Ct-HBx蛋白在肝癌组织和癌旁组织的阳性表达率分别为：45.45%（210/462）和11.79%（31/263）。Ct-HBx蛋白在263例配对的肝癌组织和癌旁组织的阳性表达率分别为：43.73%（115/263）和11.79%（31/263）。Ct-HBx蛋白在配对肝癌组织和癌栓组织的阳性表达率分别为：40%（10/25）和64%（16/25）。结果显示：Ct-HBx蛋白在肝癌组织中的阳性表达高于癌旁组织，并且具有显著性差异（P＜0.05）。
2、以复发率和生存率为因变量，临床病理因素进行单因素Cox回归模型分析，结果显示：年龄、门静脉癌栓（PVTT）、术前天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、术前丙氨酸氨基转移酶（ALT）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、术前甲胎蛋白（AFP）、肿瘤大小、主瘤旁微小子灶、癌巢内血管癌栓、肿瘤分化程度、肝硬化程度、术前巴塞罗那（BCLC）分期、术后抗病毒治疗与术后复发密切相关（P＜0.05）。性别、年龄、门静脉癌栓、术前AST、术前ALT、HBeAg、术前AFP、术前总胆红素、肿瘤大小、肿瘤包膜、主瘤旁微小子灶、癌巢内血管癌栓、肿瘤分化程度、肝硬化程度、术前BCLC分期、术后抗病毒治疗和Ct-HBx蛋白表达与术后生存密切相关(P＜0.05）。
3、多因素Cox回归模型分析采用forward: LR法进行筛选，结果显示：术后抗病毒治疗、年龄、术前AFP、术前AST、门静脉癌栓、主瘤旁微小子灶和术前BCLC 分期是肝癌患者术后复发的独立危险因素(P＜0.05)。Ct-HBx蛋白表达、术前AFP、门静脉癌栓、肿瘤包膜和术前 BCLC 分期是肝癌患者术后生存的独立危险因素(P＜0.05)。
4、462例肝癌组织和263例癌旁组织进行组间基线对比分析，结果显示：肝癌组织中Ct-HBx蛋白的表达与术前BCLC分期、术后抗病毒治疗和性别显著相关（P值分别为0.04、0.02和0.01）。癌旁组织中Ct-HBx蛋白的表达与临床病理因素均无显著相关（P＞0.05）。
5、263例配对肝癌组织和癌旁组织进行组间基线对比分析，结果显示：肝癌组织中Ct-HBx蛋白的表达与糖类抗原（CA19-9）、术后抗病毒治疗和性别显著相关（P值分别为0.04、0.04和0.01）。癌旁组织中Ct-HBx蛋白的表达与临床病理因素均无显著相关（P＞0.05）。
6、四组Ct-HBx蛋白分组表达进行组间基线对比分析，结果显示：
1)癌组织和癌旁组织均阴性表达的患者与癌组织阳性表达且癌旁组织阴性表达的患者相比，存在性别分布差异（P=0.01）；
2)癌组织和癌旁组织均阴性表达的患者与癌组织和癌旁组织均阳性表达的患者相比，HBeAg阳性率具有统计学差异（P=0.04）；
3)癌组织和癌旁组织均阳性表达的患者与癌组织阴性表达且癌旁组织阳性表达的患者相比，两组间术前HBV DNA载量具有统计学差异（P=0.02）；
4)癌组织和癌旁组织均阴性表达的患者与癌组织和癌旁组织均阳性表达、癌组织阴性表达且癌旁组织阳性表达的患者相比，肿瘤分化程度具有统计学差异（P 值分别为0.04和0.04）；
5)癌组织阳性表达且癌旁组织阴性表达的患者与癌组织阴性表达且癌旁组织阳性表达的患者相比，肿瘤分化程度具有统计学差异（P=0.04）。
6)其他分组表达与临床病理因素均无显著相关（P＞0.05）。
7、临床病理因素与预后相关性分析发现：Ct-HBx蛋白在癌旁组织中阴性表达可改善术前AFP≤200μg/L、无门静脉癌栓、无主瘤旁微小子灶、术后抗病毒治疗的患者人群的无瘤生存期（RFS)（P值均分别为0.01）。
8、分层分析发现：术后未接受抗病毒治疗组，Ct-HBx蛋白在肝癌组织中阳性表达可降低患者总体生存期（OS)（P=0.06）；不论 Ct-HBx 蛋白在癌组织中如何表达，术后抗病毒治疗均可改善RFS（P＜0.01，P=0.01)。
9、Kaplan Meier生存分析发现：Ct-HBx蛋白在癌组织阴性表达且癌旁组织阳性表达的患者与癌和癌旁组织全阴性表达的患者在 RFS 有显著性差异（P=0.05），而在OS有边缘显著性差异（P=0.06）。
结论 Ct-HBx蛋白的表达情况与术后HCC患者预后相关，Ct-HBx蛋白可以作为预测术后肿瘤复发和生存情况的有效分子标记物，其确切的机制有待于进一步研究。