人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的研制及pcDNA3/βhCG-CTP真核表达载体的构建

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为获得针对人绒毛膜促性腺激素β亚基羧基末端37肽(βhCG-CTP)单克隆抗体,采用hCG(人绒毛膜促性腺激素)纯品免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞NS-1融合,经反复筛选和克隆化后得到了6株稳定分泌单克隆抗体(McAb)的细胞株.酶联免疫吸附测定(ELISA)结果表明,所得抗体均为IgG1、κ型,其腹水效价均可达10<-6>.为探讨采用βhCG-CTP基因片段免疫小鼠制备单克隆抗体的可能性,该文采用化学合成法得到βhCG-CTP基因片段,亚克隆至真核表达载体pcDNA3中,然后导入E.coil DH5α,经EocRⅠ、BamHⅠ双酶切鉴定重组质粒,测序结果显示插入序列与预期设计完全一致.该文所获得的结果将对hCGA的特异检出和进一步利用基因免疫制备单克隆抗体的研究奠定基础.
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