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运用酶学分析方法和组织学技术，研究了水体中不同浓度Cu2+或Zn2+及Cd2+与Zn2+交互作用胁迫对拟穴青蟹生理生化以及鳃和肝胰腺显微结构的影响，探讨Cu2+或Zn2+及Cu2+与Zn2+交互作用胁迫对拟穴青蟹生理生化的影响及免疫防御机制，以期为其健康养殖水质管理提供理论指导，并为甲壳动物环境免疫学研究积累基础资料。本试验的主要结果和结论如下：
1．Cu2+及Cu2+与Zn2+交互作用胁迫对拟穴青蟹血淋巴中THC的影响
在Cu2+≤0.1 mg·L-1胁迫第1天可诱导拟穴青蟹血淋巴中THC的升高，随着胁迫时间的延长，THC显著下降后回升至对照组水平，在Cu2+≥2.0 mg·L-1及Cu2+与Zn2+交互作用胁迫下的9d试验期间，THC均显著低于对照组(P＜0.05)。结合本试验拟穴青蟹血淋巴中PO活性变化，THC与PO活性存在一定相关性，THC较多时，PO活性较高，THC减少时，PO活性较低。
2．Cu2+或Zn2+及Cu2+与Zn2+交互作用胁迫显著影响拟穴青蟹的生理生化，且存在一定的时间一剂量效应。
Cu2+≤0.1 mg·L-1胁迫下，拟穴青蟹体内CuZn-SOD、GSH-Px活性在短时间内可被激活，随着胁迫时间延长，其活性回落，而MDA含量变化不显著(P＞0.05)。Cu2+≥1.0 mg·L-1胁迫下，CuZn-SOD活性表现为持续抑制作用，其中肌肉中CuZn-SOD活性低于对照组虽被抑制却呈逐步上升趋势；而拟穴青蟹体内GSH-Px活性被持续激活。同时，较低Cu2+浓度组GSH-Px活性与MDA含量存在负相关，而较高Cu2+浓度组GSH-Px活性与MDA含量存在正相关，即较高Cu2+浓度组拟穴青蟹体内MDA含量显著增加(P＜0.05)。Cu2+胁迫可以显著激活拟穴青蟹体内ACP活性(P＜0.05)，同时随时间的延长会对ACP活性产生抑制作用。较低Cu2+浓度胁迫在激活拟穴青蟹体内AKP活性后下降至对照组水平，而较高Cu2+胁迫则对AKP活性初期有抑制作用，后AKP活性有所回升。较低Cu2+浓度胁迫下拟穴青蟹血淋巴抗菌力(Uα)呈上升趋势，而较高Cu2+胁迫则对Uα有抑制作用，同时Cu2+胁迫对Uα的抑制作用具有时间累积效应。在Cu2+胁迫初期拟穴青蟹血淋巴溶菌酶(UL)活性随着Cu2+浓度的增大有逐步上升趋势，而随着Cu2+胁迫进一步进行，较高Cu2+浓度组UL活性逐步下降。
Zn2+≤1.00mg·L-1胁迫下，拟穴青蟹血淋巴中PO、CuZn—SOD、GSH—Px以及体内CuZn—SOD、ACP、AKP活性被显著诱导后呈下降趋势，而Uα呈上升趋势；Zn2+≥20.0mg·L-1胁迫下，对拟穴青蟹体内PO、CuZn—SOD、GSH—Px、ACP、AKP、Uα活性表现出明显的抑制作用，后随胁迫时间延长略有回升。UL活性随着Zn2+浓度的增大呈下降趋势。
3．CA组、CB组的拟穴青蟹在9d试验期间，其体内THC、PO、GSH—Px、ACP、Uα以及UL等指标分别低于C100组、C200组，且CB组小于CA组，表明在外加固定浓度Zn2+情况下，Cu2+与Zn2+交互作用比单一Cu2+胁迫对上述指标更具抑制作用，对拟穴青蟹更具有毒性作用，Cu2+与Zn2+表现出协同作用。Cu2+与Zn2+交互胁迫对拟穴青蟹体内CuZn—SOD及AKP等酶活性产生激活效应。Cu2+与Zn2+交互作用胁迫对拟穴青蟹体内MDA含量变化差异不显著(P＞0.05)。
4．组织学观察表明，Ca2+及Cu2+与Zn2+交互作用胁迫下拟穴青蟹鳃及肝胰腺组织细胞结构发生了氧化损伤，作用于鳃上皮细胞及肝胰腺肝小管引起细胞结构受损，影响了拟穴青蟹正常的生理生化功能，且这种损伤随着水体中添加的重金属浓度的升高而加剧。
综上所述，Cu2+或Zn2+及Cu2+与Zn2+交互作用胁迫对拟穴青蟹体内主要生理生化影响显著，而且损伤其鳃、肝胰腺等器官的正常结构和功能。