游离空肠瓣浆膜面修复气管缺损的实验研究

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背景与目的:   因肿瘤、创伤等疾病需切除部分气管,对于一些造成较大范围缺损特别是环形长段的缺损,目前尚没有理想的修复重建方法。自体小肠来源充足、易于再血管化,被认为是用于重建气管的良好材料。但用小肠重建气管后,腔面难以呼吸道上皮化以及存在继续分泌小肠液的问题。本课题将通过建立游离空肠瓣浆膜面修复气管壁部分缺损的实验动物模型来重点研究修复后其上皮的变化过程,以及内支架对修复过程的影响,为长段气管缺损重建提供新的方法及依据。   方法:   选用国际通用标准实验用Beagle犬10条,分为不放置支架组和放置支架组(硅胶管内支架),各5条。颈部气管前壁制作2cm×4cm大小窗型缺损;剖腹取一约6cm长带肠系膜动静脉的空肠段,制作成去黏膜的空肠瓣;通过血管吻合将游离空肠瓣移植到颈部;沿气管缺损部位放置入硅胶管内支架(无支架组略去本步骤);用移植的肠瓣浆膜面对向气管腔修补气管缺损;作低位气管造瘘口。术后观察实验犬的一般状况;通过纤维支气管镜检查观察气道情况;定点处死实验动物,对气管修复部位通过大体观察以及光镜和扫描电镜的组织学观察。   结果:   10例实验犬其中1例(支架组)因手术时间过长,麻醉药过量,手术后麻醉恢复期死亡;另有1例(无支架组)术后1周内纤维支气管镜检查发现移植的肠瓣坏死,提前处死中止该例实验。存活的实验犬8例,术后均无明显咳嗽和呼吸困难表现,纤维支气管镜检查示移植空肠瓣成活。   8例存活实验犬分别于术后2周、4周、8周、12周各处死2例(无支架组和支架组各1例),对修复部位标本进行观察。   大体肉眼观察:术后各时间点肠瓣外侧面与颈部周围组织紧密粘连生长。无支架组,术后各时间点见腔面光滑,无肉芽或瘢痕形成。硅胶管内支架组,术后2周及4周腔面较光滑,无明显肉芽或瘢痕形成;术后8周及术后12周见修复部位中央区域分别有肉芽组织及瘢痕形成。   光镜下观察:①无支架组:术后2周,修复部位近吻合口处表面见柱状上皮移行生长;术后4周,修复部位表面基本由纤毛柱状上皮覆盖,细胞层次不均匀;术后8周及12周,表面均由成熟的假复层纤毛柱状上皮所覆盖。②支架组:术后2周,修复部位吻合口处表面见鳞状上皮移行生长;术后4周,表面见柱状上皮移行生长并已越过吻合口一段距离;术后8周,表面见纤毛柱状上皮移行生长,未完全覆盖;术后12周,表面基本被纤毛柱状上皮覆盖。   扫描电镜下观察:①无支架组:术后2周,见柱状细胞表面有疏少、短小的纤毛;术后4周,修复部位表面纤毛较丰富、较长,但排列和方向无序;术后8周及12周,表面纤毛稠密,纤毛排列及方向较整齐,有散在的杯状细胞。②支架组:术后2周,吻合口处表面见鳞状上皮;术后4周,修复部位表面上皮覆盖处为无纤毛的柱状细胞;术后8周,见纤毛细胞及无纤毛细胞混合存在,纤毛较丰富、较长;术后12周,修复部位表面纤毛丰富,排列及方向较整齐。   结论:   1.用游离空肠瓣浆膜面修复气管壁部分缺损,缺损周围气管黏膜上皮可以沿修复组织表面移行生长,2cm×4cm的缺损术后8周时完全由假复层纤毛柱状上皮覆盖。   2.用游离空肠瓣浆膜面修复气管壁部分缺损,硅胶管内支架可能会推迟其上皮化进程。   3.通过将固有层与黏膜肌层剥离的方法,可以完全去除空肠黏膜上皮及肠腺,术后移植肠瓣与周围组织愈合良好。
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