白癜风是一种由于黑素细胞特发性损害而致色素脱失的获得性皮肤病，其病因及发病机制迄今尚未完全阐明。与之相关的主要学说有：自身免疫、黑素细胞自身破坏、神经化学因子、遗传因素等。 酪氨酸酶是黑素生成的主要限速酶，在黑素生成过程中起着至关重要的作用。中医药治疗色素病有丰富的临床经验，近年来很多学者用多巴氧化速率法进行治疗色素病的药物筛选，发现许多药物对酪氨酸酶活性有激活或抑制作用，部分阐明了中医药治疗色素病的现代药理。我国传统中医药在治疗皮肤色素沉着过多性疾病方面积累了丰富的经验，大多学者常利用促进或抑制酪氨酸酶活性试验，研究筛选治疗皮肤色素沉着过多症的药物，并将一些可作为酪氨酸酶促进剂或抑制剂的物质应用到治疗色素性疾病中。然而，这些实验绝大部分是用中药水煎液或醇提物按一定浓度直接加到反应体系中，尚未考虑中药经人体吸收后产生的一系列变化对实验的影响，因而大多数实验结果与临床用药的差距较大，指导作用不明显。 自1988年日本国立京都医院的田代真一提出中药血清药理学这一新概念以来，国内陆续开展了这方面的研究工作。由于它同中药粗制剂直接进行的体外实验相比，既有实验条件可控性强，药物易于检测，可深入揭示药物作用机制的特点，又能防止粗制剂本身理化性质对实验的干扰，还能反映中药在胃肠道消化吸收、经生物转化，产生药理效应的真实过程，并代表了药物在体内产生作用的真正有效成分，因此特别适合中药复方成分复杂的特点。 运用体外重建表皮的黑素单位对黑素产生及黑素小体转运的研究是至关重要的。KC与黑素细胞共同生长，因此能够将显微技术、细胞和分子技术结合起来共同研究黑素小体转运。运用KC与黑素细胞的培养物，Hedyn等发现角质形成细胞(KC)产生的因子可调控这个过程。Bessou等证实了在中波紫外线(UVB)的照射下体外重建表皮类似物时的黑素小体转运的增强。单个或成簇的黑素小体既存在于皮肤类似物的基底层，也存在于角质层。Gibbs发现在体外表皮类似物中KC的核上方有黑素帽结构的形成，认为在重建系统中完成了皮肤色素沉着的过程。这些研究证实了表皮类似物中有黑素小体的合成、转运及形成黑素帽结构的过程，并发现表皮类似物变黑，说明这个系统能够用来进行黑素小体转运机制的研究。 本研究运用白消一号含药血清，作用于体外培养黑素瘤细胞和KC混合模型，对其在黑素瘤细胞生长、酪氨酸酶的活性和黑素合成以及黑素小体的转移等方面进行了研究，为进一步探讨中药治疗白癜风的机制研究奠定基础。主要研究内容、方法和结果如下： 第一部分白消一号含药血清对表皮黑素单元中黑素瘤细胞作用的研究 [目的]体外构建黑素瘤细胞与KC直接接触的混合培养模型，观察白消一号对此模型中黑素瘤细胞的影响，探讨其治疗白癜风的药理作用。 [方法]运用血清药理学方法对复方中药白消一号进行研究，分别培养KC、黑素瘤细胞；体外构建黑素瘤细胞与KC直接接触的混合培养模型，大鼠中药灌胃后于末次给药30min、60min、120min、180min、300min采血，制各血清，加入体外培养模型中，用MTT法、多巴氧化法、及NaOH法，检测含药血清对黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性以及黑素合成的影响。 [结果]含药血清可促进黑素瘤细胞增殖，上调酪氨酸酶活性，增加黑素合成。尤以60min、120min时间点采血时含药血清作用最为明显。 [结论]成功构建了黑素瘤细胞与KC直接接触的混合培养模型，白消一号作用于此模型对黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素的合成均呈促进作用。 第二部分白消一号含药血清对表皮黑素单元黑素小体作用的研究 [目的]体外构建黑素瘤细胞与KC直接接触的混合培养模型，并且观察白消一号对此模型中黑素小体的转运的影响，探讨复方中药治疗白癜风可能的药理作用。 [方法]体外分别培养黑素瘤细胞和KC，用二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记黑素瘤细胞内的黑素小体，然后将两种细胞共培养。大鼠中药灌胃后120min取其血清并加入此模型中，在倒置显微镜下观察混合细胞模型生长及共聚焦显微镜下观察第1、3、5天共培养模型中黑素小体由黑素瘤细胞向KC的转运情况。 [结果]含药血清可使黑素小体由黑素瘤细胞向KC的转运增加较对照组明显。 [结论]白消一号可以促进黑素小体转运，此途径可能为白消一号治疗白癜风的作用机制之一。