论文部分内容阅读
心脑血管疾病是现代人类健康的第一杀手。全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万。我国人群心脑血管疾病的患病率、发病率及其危险因素水平也呈不断上升趋势。另有统计显示,心脑血管疾病的死亡率远高于癌症及其他疾病。因此,心脑血管疾病的防治工作任重而道远。芍药苷(Paeoniflorn)为蒎烷单萜苷类化合物,是白芍和赤芍的主要活性成分之一。药效学研究表明,芍药苷对心脑血管疾病具有显著的药理活性。因此,将芍药苷制成一个防治心脑血管疾病的新药,具有良好的应用前景。本文以对心脑血管疾病有显著疗效的芍药苷为模型药物,选择现代制剂方法——系统地开展将凝胶骨架缓释原理应用于芍药苷的制剂技术、适用规律、评价方法等研究。根据芍药苷制剂临床用药特点和药物的性质,对其提取条件、分离纯化工艺、辅料筛选、处方优化等进行了系统研究,制定合理、可行的制备工艺路线,并建立含量测定标准,对其体外释放度、微生物转化和在体肠吸收进行了评价,为芍药苷进一步的临床研究和应用奠定了一定基础。1.芍药苷提取条件的确定在芍药苷的制备工艺研究中,首先经过闪式提取获得赤芍总苷,并以芍药苷、芍药内酯苷的含量为评价指标,对赤芍药材的提取方法进行考察,采用正交试验方法对赤芍总苷的提取工艺条件进行了筛选,确定闪式提取赤芍总苷的最佳提取工艺为:用30倍量的水浸泡6 h,并采用70 V电压提取2 min。2.芍药苷的制备及纯化对经闪式提取获得的提取液进行进一步的分离纯化,分离得到8个化合物,经理化性质与波谱分析鉴定其中6个,分别为芍药苷(paeoniflorin,1),芍药内酯苷(albiflorin,2),邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate,3),苯甲酸(benzoic acid,4),β-谷甾醇(β-sitosterol,5),棕榈酸(palmitic acid,6)。其中,芍药苷和芍药内酯苷经HPLC检测,纯度>98%,化合物3为首次从该种植物中分离得到。3.芍药苷和芍药内酯苷的人肠内菌生物转化研究用人肠内菌体外试验法,研究肠道菌群对芍药苷和芍药内酯苷的生物转化作用,以高分辨质谱并结合质量亏损过滤技术(MDF)筛选和鉴定代谢产物,结果表明芍药苷和芍药内酯苷均能够被肠内菌代谢转化,推断出7个芍药苷代谢产物和5个芍药内酯苷代谢产物。4.芍药苷大鼠在体肠吸收情况的研究采用大鼠在体肠单向灌流法对芍药苷的在体肠吸收情况进行初步研究,通过对其在大鼠各肠段吸收情况的考察发现,芍药苷在4个肠段的Papp为(1.67~2.38)×10-3 cm·min-1,其在整个肠段均有不同程度的吸收,提示该药吸收窗较长,针对其吸收窗较长的特点,可考虑将其制成缓、控释给药体系。5.芍药苷处方前研究按照2010年版中国药典“凡例”项下溶解度试验法测定芍药苷在甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、环己烷、乙醚、石油醚等有机溶剂中的溶解性。并测定芍药苷粉末的引湿性,为药物的生产和贮存条件提供参考数据。建立了 HPLC方法测定处方中芍药苷的含量及释放度。并测定了芍药苷的平衡溶解度和油/水分配系数。结果:芍药苷在0.1 mol·L-1HCl溶液、蒸馏水、及pH5.8、pH6.8、pH7.4 PBS缓冲液中的平衡溶解度(37±0.5℃)分别为46.58,48.25,43.88,46.36,56.49 mg·mL-1,芍药苷溶解度随着pH的增加呈增大趋势;芍药苷油水分配系数也随着pH的增加呈增大趋势,不同pH值表观油/水分配系数P=1.37~1.52(lgPapp=0.14~0.18),即芍药苷水溶性佳而脂溶性较差。6.芍药苷缓释骨架片的制备工艺研究采用羟丙甲基纤维素(HPMC)为骨架材料,以湿法制粒压片法制备芍药苷亲水凝胶骨架片,并对其释药影响因素进行探讨:考察了 HPMC规格、用量、致孔剂用量、填充剂种类、压片压力及转速等对药物释放的影响,采用直观的图表数据分析和相似因子f2及K值分析相结合的方法,对不同处方释放度数据进行比较,并采用星点设计优化处方。结果:HPMC的用量以及填充剂的性质对药物释放有显著影响,以19%HPMC K4M为骨架材料、10%MCC及39%淀粉为填充剂制备得到缓释片,释放度符合要求。7.芍药苷缓释骨架片释药机制及稳定性的初步研究将累积释放曲线数据分别用Zero、First、Higuchi、Peppas模型进行拟合,其释药机制为扩散和骨架溶蚀协同作用的结果。通过影响因素试验、加速试验和长期试验方法初步考察了芍药苷缓释骨架片的稳定性,结果显示,芍药苷缓释片除对高湿条件敏感外,在光照、高温及加速试验中均表现了良好的稳定性。因此本品应密闭保存。本课题提出的研制芍药苷缓释骨架片制剂,在国内外尚未见报道,研究具有很强的创新性。采用亲水性凝胶骨架材料HPMC与填充剂等共同组成缓释片的处方,将治疗心脑血管疾病的芍药苷制备成12小时释放的缓释片,将会有很好的社会效益及经济效益。