植物乳杆菌ATCC-14917发酵对灵芝孢子粉多糖结构及抗氧化活性的影响

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hnlqlql
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灵芝孢子粉,作为传统名贵食补保健品,因具有生物活性而被人们广泛关注。但是由于灵芝孢子粉自身结构特点,无法被直接服用,经过一定方法处理后,其营养物质才能被充分吸收。利用微生物发酵可以使灵芝孢子粉多糖释放,并通过生物转化提升其生物活性价值,但是目前有关该方面的报道较少。本试验采用植物乳杆菌ATCC-14917发酵灵芝孢子粉,并利用超声辅助浸提法提取灵芝孢子粉多糖,对发酵前后多糖的结构及抗氧化性进行分析,研究发酵对灵芝孢子粉多糖的影响,为灵芝孢子粉的开发利用提供新的思路以及理论依据。(1)以发酵液多糖含量为指标,对发酵的参数进行响应面优化,最终确定发酵参数:接菌量为4%,发酵温度为38℃,发酵时间为25 h。采用以上方法发酵灵芝孢子粉,发酵液中的多糖含量最高,说明此时孢子内多糖充分释放,该工艺为灵芝孢子粉的深度开发利用提供数据支撑。(2)以多糖得率为指标,对多糖提取的的条件进行响应面优化,最终确定多糖的提取条件:水料比为57:1(v/w),超声时间为31 min,超声功率为470 W。与传统浸提法相比,利用优化后的超声辅助浸提法提取,多糖得率更高,时间更短,能耗更低,提取后的多糖性质更稳定,说明该方法具有可行性、经济性以及工艺优越性,为灵芝孢子粉多糖的进一步开发利用提供理论基础。(3)提取得到发酵前的灵芝孢子粉多糖(GLP)以及发酵后的灵芝孢子粉多糖(FGLP),分别采用紫外光谱、高效凝胶渗透色谱、扫描电镜、气相色谱、NMR以及红外光谱对GLP及FGLP的初级结构进行表征。结果表明,GLP及FGLP的主要官能团并未发生改变,但是FGLP的表面出现疏松、裂缝和数量较多的孔洞,表面积明显增大,分子量由1.12×10~5Da减小为8.89×10~4 Da,部分糖苷键发生裂解,说明FGLP由大分子分解为小分子物质。大分子多糖无法被人体直接吸收,分解后的小分子多糖能够发挥更强的活性。此外,FGLP单糖摩尔比发生变化,糖醛酸含量升高。(4)为了进一步探究发酵对灵芝孢子粉多糖的影响,对GLP及FGLP进行了抗氧化活性研究,分析对比了GLP及FGLP清除DPPH自由基、ABTS+自由基以及羟基自由基的能力,并采用H2O2诱导Hep G2细胞构建氧化应激模型,利用GLP及FGLP对氧化应激模型进行调节,测定其细胞存活率、ROS含量、MDA含量以及SOD、CAT含量。结果表明,FGLP清除DPPH自由基、ABTS+自由基以及羟基自由基的能力显著高于GLP;FGLP调节下的H2O2诱导的Hep G2细胞的细胞存活率显著高于GLP(13.39,p<0.01),ROS含量显著低于GLP(12.22%,p<0.05),MDA含量显著低于GLP(31.40%,p<0.05),SOD含量显著高于GLP(20.96,p<0.05),CAT含量均高于GLP(29.59%,p<0.05)。综合以上分析,经过植物乳杆菌发酵之后,灵芝孢子粉多糖分解为小分子多糖,且糖醛酸含量升高,从而导致其抗氧化能力显著提高。以上结论为微生物发酵开发灵芝孢子粉多糖提供数据支撑和理论依据。
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