【摘 要】
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目的:探讨七氟醚预处理(SPC)减轻心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤是否与激活信号通路HIF-1a/PDK-1,优化H9C2大鼠心肌细胞无氧糖酵解有关。方法:H9C2心肌细胞用低糖培养基培养48h后,随机分成4组:(1)对照组(Con);(2)缺氧/复氧组(H/R);(3)七氟醚预处理组(SPC);(4)七氟醚预处理组+HIF-1a抑制剂组(SPC+YC-1);建立缺氧/复氧模型,在复氧3h后,检
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目的:探讨七氟醚预处理(SPC)减轻心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤是否与激活信号通路HIF-1a/PDK-1,优化H9C2大鼠心肌细胞无氧糖酵解有关。方法:H9C2心肌细胞用低糖培养基培养48h后,随机分成4组:(1)对照组(Con);(2)缺氧/复氧组(H/R);(3)七氟醚预处理组(SPC);(4)七氟醚预处理组+HIF-1a抑制剂组(SPC+YC-1);建立缺氧/复氧模型,在复氧3h后,检测乳酸脱氢酶(LDH)、己糖激酶(HK)、6-磷酸果糖激酶-1(PFK-1)、丙酮酸激酶(PK);检测各组ATP产生量;流式检测心肌细胞凋亡比例;荧光显微镜分析膜电位变化;Western Blot检测HIF-1a、PDK-1、GAPDH及凋亡相关蛋白含量。结果:与缺氧/复氧组(H/R)相比,SPC组中调控糖酵解的关键酶(HK、PFK-1、PK)含量增加,产生ATP量增多,线粒体膜电位升高,细胞凋亡比率减少,HIF-1a、PDK-1、Bcl-2蛋白含量增加,Bax蛋白含量降低(P<0.05);与七氟醚预处理组(SPC)相比,加入HIF-1a抑制剂(YC-1)后,糖酵解关键酶(HK、PFK-1、PK)含量、ATP产生量、线粒体膜电位、HIF-1a、PDK-1、Bcl-2蛋白含量降低,而细胞凋亡比例、凋亡相关蛋白Bax含量增加(P<0.05)。结论:七氟醚预处理通过激活HIF-1a/PDK-1信号通路,优化心肌细胞糖酵解能量代谢,减轻H9C2大鼠心肌细胞H/R损伤。
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