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木霉菌是植物病害重要的生防菌之一。本研究以哈茨木霉(Trichodermaharzianum)TGY-01为实验菌株,研究菌株的生物学特性、筛选适宜双相发酵的固体培养配方和适宜木霉菌孢子粉制剂的助剂,对木霉菌孢子粉的收集、粉剂的质量指标及菌株产木聚糖酶的条件进行了研究。一、研制了以食用菌培养废料为固体培养基质制备木霉菌剂的生产工艺采用食用菌菌渣废料为基础培养基质,以单位质量的产孢量为指标,筛选出以木耳菌渣为主要基质的培养基配方,7d后的产孢量为22.26亿个·g-1。试验结果表明,木霉菌在固体发酵表层长势好、产孢量大。分别采用薄层培养(培养料厚度为0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm)和小堆培养。各种培养方法其表层产孢量相当,均在21.86亿个·g-1~23.57亿个·g-1之间。薄层培养(0.5cm)可提高单位质量的产孢能力,产孢量达23.57亿个·g-1。探索了固体发酵更充分利用培养基的条件,采用分层收集,二次搅拌培养法,3d后,产量与原来表层生长相当。二、测定了菌株TGY-01对病原菌的抑制作用对峙结果显示,菌株对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、球状菌核病菌(Sclerotium hydrophilum Sacci)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)有抑制作用,抑制率分别为80.95%、100.00%、60.00%。其中菌株对镰刀菌抑制作用可以形成明显的抑菌圈,对球状菌核病菌和立枯丝核菌则通过菌落竞争空间来抑制。三、研究了菌株TGY-01的生物学特性菌株TGY-01生物学特性的研究结果表明:葡萄糖为最佳碳源,硝酸钠为最佳氮源;培养基中NaCl的添加对菌株TGY-01产孢有影响,适宜浓度的NaCl有利于木霉菌的产孢,高浓度则对产孢有抑制作用,其中,培养基中NaCl浓度为0.1%最有利于木霉菌产孢;矿质元素K、S、Mg和P对其菌丝生长、产孢均有影响。PSA适宜木霉菌TGY-01生长,并且在pH=4的条件下最有利于产孢和菌丝的生长。耐高温试验表明,菌株分生孢子在55℃条件下保存10min后,仍可以萌发。四、菌株孢子粉的质量指标及粉剂的研制木霉菌TGY-01的分生孢子质量指标:采用血球计数板计数,用显微镜直接测收集的孢子粉(过400目标准筛)产孢量≥110亿个·g-1;在100℃烘干箱内烘2h,3次平行试验,测含水量≤13.50%;采用悬滴法,在蛋白胨-蔗糖溶液中培养12h后萌发率≥95.00%。菌剂载体、助剂的选择:通过萌发率和生物相容性的测定,筛选出高岭土为载体,吐温-80为润湿剂,PEG6000为分散剂。通过正交试验,测出其润湿时间和悬浮性。研制了木霉菌TGY-01的粉剂:吐温-800.2g、PEG60000.4g、菌粉0.4g,其余用高岭土填充到5.0g;通过测定:该粉剂的润湿时间13.57min,含水量4.37%,细度为92.25%(过400目标准筛),含孢量为10亿个·g-1。五、菌株TGY-01产木聚糖酶条件的选择研究了时间、碳源、氮源、表面活性剂的量、碳源的浓度等因素对液体发酵液产木聚糖酶的影响。试验结果明确了:木霉菌TGY-01产木聚糖酶最佳碳源葡萄糖、最佳氮源硝酸钠;在一定浓度范围内,碳源的含量越高,木聚糖酶的活性就越高;最佳培养时间3d;最佳的表面活性剂吐温-80含量是0.15%。