【摘 要】
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第一部分GATA2-AS1在肾癌细胞系及肾细胞癌组织中的表达目的:探讨长链非编码RNAs（long non-coding RNAs,lnc RNAs）GATA2-AS1在肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）组织及细胞株中的表达情况,并分析其表达情况与患者临床病理参数之间的关系。方法:应用实时荧光定量多聚核苷酸酶链式反应（Real-time quantitative poly
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第一部分GATA2-AS1在肾癌细胞系及肾细胞癌组织中的表达目的:探讨长链非编码RNAs（long non-coding RNAs,lnc RNAs）GATA2-AS1在肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）组织及细胞株中的表达情况,并分析其表达情况与患者临床病理参数之间的关系。方法:应用实时荧光定量多聚核苷酸酶链式反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR）检测GATA2-AS1基因在71例肾细胞癌组织和与其相对应癌旁正常组织以及2株肾癌细胞（786-O、ACHN）中的表达情况。结果:1.GATA2-AS1基因在肾癌细胞系中的表达情况:GATA2-AS1在2株肾癌细胞系中相对表达量均明显下调（P均<0.01）,其中ACHN细胞的GATA2-AS1表达水平最低。2.GATA2-AS1基因在RCC组织及其相对应癌旁正常组织中的表达情况:GATA2-AS1在RCC组织中的相对表达量显著低于癌旁组织（P<0.01）,GATA2-AS1在RCC组织中的表达水平与TNM分期及淋巴结转移相关（P均<0.05）,但与性别、年龄和组织分化程度无关（P均>0.05）。第二部分GATA2-AS1对肾癌细胞生物学行为的影响目的:研究过表达GATA2-AS1基因对肾癌细胞生物学行为的影响。方法:1.构建过表达载体pc DNA3.1-GATA2-AS1并转染肾癌细胞ACHN,并通过RT-q PCR的方法检测转染的效率。2.应用MTS、克隆形成实验检测过表达GATA2-AS1基因后对ACHN细胞体外增殖能力的影响。3.应用划痕实验检测过表达GATA2-AS1基因后对ACHN细胞体外迁移能力的影响。4.应用Transwell小室侵袭实验检测过表达GATA2-AS1基因后对ACHN细胞体外侵袭能力的影响。结果:1.过表达载体pc DNA3.1-GATA2-AS1的构建及转染效率的验证:成功构建过表达载体pc DNA3.1-GATA2-AS1并转染肾癌细胞ACHN,通过RT-q PCR方法验证转染效率发现,过表达组GATA2-AS1的相对表达量显著高于对照组（P<0.01）。2.过表达GATA2-AS1对肾癌细胞体外增殖能力的影响:MTS和克隆形成实验结果显示,过表达GATA2-AS1能够明显抑制ACHN细胞的体外增殖能力（P<0.05 or P<0.01）。3.过表达GATA2-AS1对肾癌细胞体外迁移能力的影响:划痕实验结果显示,过表达GATA2-AS1能够明显抑制ACHN细胞的体外迁移能力（P<0.05）。4.过表达GATA2-AS1对肾癌细胞体外侵袭能力的影响:Transwell小室侵袭实验的结果显示,过表达GATA2-AS1能够明显抑制ACHN细胞的体外侵袭能力（P<0.01）。结论:1.GATA2-AS1在肾癌细胞系及肾细胞癌组织中低表达,并与TNM分期及淋巴结转移相关。2.过表达GATA2-AS1基因可以抑制肾癌细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力。
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