生物转化制备人参Rg2(组)的研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wl281472
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本论文主要研究了人参皂苷Re的制备工艺、菌种sp.39所产的人参皂苷酶转化Re和Rg2皂苷的最优工艺条件以及关于人参皂苷Rg2、Rg4、Rg6为主的混合物的分离、纯化工艺。首先,使用AB-8大孔吸附树脂柱对5g人参茎叶皂苷及人参叶皂苷进行分离研究,得出了各组混合皂苷的洗脱条件:分别使用36.3%、35%乙醇溶液洗脱,得到了较纯的Re、Rg1混合皂苷。以50g人参皂苷Re、Rg1为主的混合物为原料,通过重结晶法制备了人参皂苷Re,得到23.6g皂苷Re,得率为47.2%。其次,通过培养菌种sp.39来获得实验所需的人参皂苷酶。确定了酶反应条件:该酶在pH6、40℃、底物浓度0.2%的情况下反应24h,能将人参三醇类皂苷Rg2几乎全部转化为Rh1;在pH6、40℃、底物浓度1.0%的情况下反应48h,该酶能使Re生成Rg1的转化率最大化。然后,以人参皂苷Rg2、Rg4、Rg6为主的混合物为原料,选用AB-8大孔吸附树脂柱作为分离柱;确定最适洗脱条件为:42%乙醇溶液。50g人参皂苷Rg2、Rg4、Rg6为主的混合物,通过AB-8大孔吸附树脂柱,使用9倍体积42%乙醇溶液洗脱,得到了 5g纯度为89.9%的Rg2皂苷,得率为10%。以5gRg2皂苷为原料,运用重结晶法,对分离粗产品中的20(S)-Rg2及20(R)-Rg2两种皂苷分别进行了分离,得到纯度为85%的20(R)-Rg2皂苷0.9g,得率为18%;得到纯度为97.1%的20(R)-Rg2皂苷0.4g,得率为8%;得到纯度为84%的20(S)-Rg2皂苷0.3g,得率为6%;得到纯度为84.6%的20(S)-Rg2皂苷0.8g,得率为16%;得到纯度为82.9%的20(S)-Rg2皂苷0.3g,得率为6%。最后,通过制备色谱技术,考察了以人参皂苷20(S)-Rg2、20(R)-Rg2、Rg6、Rg4为主的混合物的分离效果。结果,20(S)-Rg2、20(R)-Rg2、Rg6、Rg4的纯度分别为95.3%、96.4%、96.3%、98.3%。
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