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血管平滑肌细胞位于正常血管结构的中层,是维持血管张力和构成血管壁组织结构的主要细胞成分。大量的研究表明血管平滑肌细胞不仅是正常血管的重要组成部分,在心脑血管疾病的发生发展过程中也扮演了重要的角色。心脑血管疾病因为疾病早期没有典型的症状往往容易被人们忽视,但疾病发展到一定程度,由于没有快速有效的治疗手段,造成致残、致死率都远远高于其它疾病。近些年来,已然发展成为人类生命健康的重大威胁。因此,进一步了解影响血管平滑肌细胞增殖和凋亡的机制和新的靶向治疗方向,对心脑血管疾病的治疗有重要的意义。核因子κB(NF-κB)是诱导型转录因子家族,在免疫应答的不同方面起着至关重要的作用。NF-κB通常通过与称为IκB的抑制蛋白的物理结合而作为无活性复合物在细胞质中隔离。当细胞接受免疫和应激刺激,NF-κB成员通过两个主要的信号通路,即经典和非经典途径被激活,并进入细胞核以发挥转录功能。诸多研究表明NF-κB通路的激活介导TNF-α,IL-1和IL-6等促炎细胞因子的转录以及各种趋化因子的产生。这些可溶性因子与其特异性受体结合,诱导血管舒张以及单核细胞和中性粒细胞向炎症部位的迁移。然而NF-κB调控血管平滑肌细胞的机制却尚未完全阐明。目的:本实验为了明确NF-κB对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响,并探究其潜在的分子机制,为动脉粥样硬化等心脑血管性疾病的靶向治疗奠定坚实的理论基础。方法:将血管平滑肌细胞分为正常对照组、NF-κB抑制剂IMD-0354组、NF-κB过表达载体+NF-κB抑制剂IMD-0354组、空载+NF-κB抑制剂IMD-0354组、NF-κB过表达组、空载组。通过构建NF-κB过表达载体,转染血管平滑肌细胞后,通过MTT检测各组血管平滑肌细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组血管平滑肌细胞的凋亡情况,Western blot检测各组血管平滑肌细胞NF-κB、凋亡相关因子配体(Fasl)、高血压相关基因(HRG-1)相对表达情况;并分析NF-κB调控血管平滑肌细胞增殖和凋亡的机制。结果:酶切实验证明NF-κB过表达载体构建正确;成功转染HA-VSMC细胞后,MTT检测结果显示NF-κB被激活可以抑制血管平滑肌细胞增殖;流式检测细胞凋亡结果也证实NF-κB激活可以促进血管平滑肌细胞凋亡;Western blot检测结果提示激活NF-κB后,血管平滑肌细胞中Fasl和HRG-1蛋白的表达均增高。结论:1、NF-κB的激活可以促进血管平滑肌细胞的凋亡,抑制血管平滑肌细胞的增殖;2、NF-κB可能通过促进Fasl和HRG-1的表达调控血管平滑肌细胞的增殖与凋亡。