杂色蛤降血糖功能性产品的研究开发

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本文以杂色蛤为研究对象,主要从杂色蛤α-葡萄糖苷酶抑制肽的制备工艺优化,酶解用酶固定化工艺研究,杂色蛤降血糖多肽的纯化及微胶囊制备四个方面进行研究,主要结果如下:1、利用酶解法制备杂色蛤α-葡萄糖苷酶抑制肽,以水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,采用单因素和正交实验对酶解工艺进行优化,得到最佳工艺条件为:料液比(m/v)1:30,加酶量2.0%,酶解时间180min,酶解温度32℃,p H2.0。在该条件下,胃蛋白酶对杂色蛤有较好的酶解效果,验证实验结果表明,在上述最优条件下,杂色蛤酶解液的蛋白水解度为17.4%;当酶解产物浓度为50mg/m L时,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为50.2%。2、利用海藻酸钠-壳聚糖对胃蛋白酶进行固定化,以酶活回收率为指标,采用响应面分析法进行固定化工艺优化,得到最佳工艺条件为:海藻酸钠浓度为0.9%,游离酶稀释倍数为10倍,氯化钙浓度为3.6%,固定化时间为1.5h,在该条件下固定化酶的酶活回收率为73.42%。用固定化胃蛋白酶酶解杂色蛤制备的多肽对α-葡萄糖苷酶的抑制率为54.07%,结果表明:固定化胃蛋白酶的酶解效率略高于游离酶。3、以多肽对α-葡萄糖苷酶的抑制率为指标,采用DEAE-F.F及Sephadex G-25对杂色蛤降血糖多肽进行分离纯化,得到具有较高抑制活性的组分G,并测定该组分的分子量约为580Da。4、利用海藻酸钠-壳聚糖对杂色蛤降血糖多肽进行包埋制备微胶囊,以包埋率为指标,采用正交实验分析得到最优工艺为:海藻酸钠浓度为1%,海藻酸钠与降血糖肽的比例为1:5,氯化钙浓度为5%,壳聚糖浓度2%。在该条件下得到的包埋率:67.21%,有效载物量:33.67%。该工艺制备的微胶囊在模拟胃液中仅有极少量释放,在模拟肠液中有良好的释放性能。制备的杂色蛤多肽微胶囊经过胶囊封装后得到降血糖功能性产品。
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