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缺血性脑卒中是世界上死亡的第二大原因,也是我国成年人致死和致残的首位原因,是我国因病致贫、因病返贫的重要原因之一。目前常用的药物主要溶栓、抗凝、降血脂类药物,临床效果并不理想。血塞通注射液的主要成分为传统中药三七总皂苷,具有活血祛瘀,通脉活络的功效。已有实验表明血塞通具有抗凋亡、抗氧化等作用,但具体机制不清楚。目的:在复制大鼠局灶性脑缺血(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型的基础上,从氧化应激的角度探讨血塞通对局灶性脑缺血的保护作用及机制,为脑血管疾病的有效治疗方案提供重要的理论基础和实验依据。方法:1.复制MCAO模型:将Wistar大鼠随机分为5组:假手术组,MCAO组,血塞通小剂量组(2.5mg/Kg),血塞通中剂量组(5mg/Kg),血塞通大剂量组(10mg/Kg)。假手术组、MCAO组连续给予生理盐水一周,血塞通注射液连续给药一周后,采用线栓法复制MCAO模型(缺血2h再灌注24h)。2.采用Zea-Longa方法进行神经行为学评分,检测大鼠神经功能缺陷。3.采用TTC染色检测大鼠脑梗死面积。4.采用HE染色检测大鼠脑皮质损伤程度。5.采用RT-PCR及Western blot检测大脑皮质凋亡相关基因mRNA及蛋白的表达。6.采用SOD、MDA试剂盒检测大脑皮质的氧化应激水平。7.采用Western blot及RT-PCR检测大脑皮质KEAP1和NRF2蛋白表达及下游靶基因nqo1、gclm和ho1 mRNA的表达。结果:1.Zea-Longa神经行为学评分结果显示,与假手术组相比,MCAO组大鼠出现明显的神经功能障碍,评分明显增高;血塞通各组大鼠神经功能障碍明显减轻,神经行为学评分明显降低。2.TTC染色结果显示,与假手术组相比,MCAO组可见苍白色的梗死区域,其梗死面积明显增加;而血塞通各组大鼠大脑梗死面积明显减小。3.HE染色结果显示,MCAO组大鼠脑皮质神经元固缩呈三角形,胞质深染,神经元的数目减少。而血塞通各组大鼠,具有缺血特征的神经元数目明显减少。4.MCAO组bcl-2 mRNA及蛋白表达明显降低,bax mRNA及蛋白表达明显增加,caspase3 mRNA及蛋白表达明显增加。而血塞通各组能明显促进bcl-2mRNA及蛋白表达,抑制bax mRNA及蛋白,同时使caspase3 mRNA及蛋白表达明显降低,说明血塞通可以明显减轻大脑皮质凋亡。5.MCAO模型组大鼠脑皮质中MDA含量明显增加,而SOD活力明显下降。而血塞通各组MDA含量明显下降,SOD活力明显升高,说明血塞通可以清除自由基,具有抗氧化作用。6.MCAO组的KEAP1的蛋白表达水平明显增高,而NRF2蛋白表达明显降低,其下游靶基因nqo1、gclm及ho1 mRNA表达水平明显下降;而血塞通各组大鼠大脑皮质KEAP1蛋白表达明显降低,NRF2的蛋白表达明显升高,其下游靶基因nqo1、gclm及ho1 mRNA表达水平明显增高,说明血塞通可能通过恢复Keap1-Nrf2信号通路,发挥抗氧化作用。结论:1.血塞通能够明显减轻缺血再灌注损伤造成的脑损害,具有脑保护作用。2.血塞通的脑保护作用的机制可能是激活Keap1-Nrf2信号途径,发挥抗氧化作用实现的。