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目的:应用流式细胞技术及酶免疫测定技术研究慢性阻塞性肺病患者在不同时期、不同严重程度下免疫细胞、免疫因子的变化,探讨免疫细胞、免疫因子的变化在慢性阻塞性肺疾病的发生、发展及预后中的作用及其相关关系,并为临床免疫治疗提供可靠的理论依据。
材料与方法:选择20例健康人为对照组(A组);以5l例COPD患者为研究对象,其中COPD稳定期患者19例(B组);急性加重期(AECOPD)无呼吸衰竭(RF)或MODS忠者17例(C组);AECOPD并发RF或MODSl5例(D组)。健康人为我院医务工作人员;COPD稳定期患者来自我科登记在册、定期随访的患者,两组均于晨7:00时空腹抽取肘静脉血5ML。AECOPD患者来自我科住院患者,在入院1-3天内确诊后于晨7时空腹抽取肘静脉血5ML。所有患者血标本其中2ML保存于抗凝试管中六小时内应用美国BD公司流式仪和试剂进行检测CD3、 CD4、CD8、CD4/CD8、CD19、CD16、CD56、CDl23、CD11,用其余非抗凝血离心后取血清-70℃冷冻保存,标本数量满足后应用双夹心酶联免疫法测定血清白三烯B4(LTB4)。
结果: 1、COPD患者存在T淋巴细胞免疫调节网络平衡失调,T淋巴细胞亚群数量减低,且随病情的进展更趋明显其检测结果如下:
1.1 CD3<+>淋巴细胞:A、B、C、D四组CD3<+>细胞百分率分别是(72.56±6.95)%、(65.89±8.04)%、(62.00±10。92)%、(52.53±7.04)%,组内比较差异有统计学意义(P<0.01)。组间B组与A组比较差异有统计学意义(P<0.05),C组与A组、D组与A组、D组与B组、D组与C组比较差异均有显著统计学意义(P<0.01),C组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 CD4<+>淋巴细胞:A、B、C:D四组CD4<+>细胞百分率分别是(51.26±7.43)%、(45.31±7.58)%、(44.52±8.74)%、(37.13±7.94)%,四组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中B与A组、C组与A组、D组与B组、D组与C组比较差异均有统计学意义(P<0.05),D组与A组比较差异有显著统计学意义(P<0.01),C组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
1.3 CD4<+>/CD8<+>比值:A、B、C、D四组CD4<+>/CD8<+>比值分别为:1.63±O.35,1.33±0.34,1.30±0.38,1.00±O.33。四组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中B组与A组、c组与A组、D组与B组、D组与C组比较差异均有统计学意义(P0.05)。
1.4 CD8<+>淋巴细胞: A、B、C、D四组CD8’细胞百分率分别是(31.21±7.30)%、(36.42±7.16)%、(37.64±5.95)%、(43.73±8.82)%,四组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中B组与A组、C组与A组、D组与B组、D组与C组差异均有统计学意义(P<0.05),D组与A组差异有显著统计学意义(P<0.01),C组与B组差异无统计学意义(P>0.05)。
2、CDl9<+>淋巴细胞:A、B、C、D四组CDl9<+>细胞百分率分别是(14.46±3.55)%、(11.50±6.51)%、(16.70±9.57)%、(18.13±9.49)%,四组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
3、CDl6<+>CD56<+>细胞:A、B、C、D四组CDl6<+>CD56<+>细胞百分率分别是(29.45±5.41)%、(23.36±5.57)%、(19.82±14.33)%、(14.13±8.79)%,四组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中B组与A组、D组与B组差异均有统计学意义(P<0.05),C组与A组、D组与A组差异有显著统计学意义(P<0.01),C组与B组、D组与C组差异无统计学意义(P>0.05)。
4、树突细胞亚群
4.1 CDl23<+>细胞: A、B、C、D四组CDl23<+>细胞百分率分别是(0.14±0.07)%、(0.09±0.05)%、(0.02±0.02)%、(0.01±0.01)%,四组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中C组与A组、D组与A组、C组与B组、D组与B组差异均有统计学意义(P<0.05),B组与A组、D组与C组差异无统计学意义(P>0.05)。
4.2 CDll<+>细胞: A、B、C、D四组CDll<+>细胞百分率分别是(0.22±0.06)%、(0.22±0.07)%、(0.10±0.10)%、(0.06±0.07)%,四组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中Cx组与A组、D组与A组、C组与B组、D组与B组差异均有统计学意义(P<0.05),B组与A组、D组与C组差异无统计学意义(P>0.05)。
5、LTB4:A、B、C、D四组LTB4(pg/u1)结果分别是0.81±0.57、1.42±1.21、4.26±1.57、4.25±1.15,四组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中C组与A组、D组与A组、C组与B组、D组与B组差异均有统计学意义(P<0.05),B组与A组、D组与C组差异无统计学意义(P>0.05)。七例COPD并发MODS患者LTB4水平明显增高,因例数较少未单独统计比较,待进一步研究观察。
结论:COPD患者存在细胞免疫功能异常,出现CD3<+>、CD4<+>、CD4<+>/CD8<+>比值的下降,CD8<+>淋巴细胞免疫反应增强,N K细胞下降,外周血DC均明显少于正常人。COPD急性发作期免疫功能显著降低,且随着病情加重免疫功能进一步下降。但B淋巴细胞(CDl9<+>)在COPD发病中的作用和地位尚不明确。炎症细胞因子白三烯B4增高,参与气道炎症过程。
1 COPD患者T细胞总数或/和Th细胞数量显著减少,表现为CD3<+>、 CD4<+>、CD4<+>/CD8<+>下降,和健康人比较明显下降;急性加重期进一步下降,但和稳定期比较无明显差异;急性加重期并发呼吸衰竭以上指标下降更加明显,和’COPD稳定期及急性加重期不伴呼吸衰竭患者比较均有显著差异,患者免疫功能严重下降。
2 COPD患者CD8<+>淋巴细胞和正常人比较数量明显增加;在急性加重期进一步升高,但和稳定期比较差异无统计学意义;急性加重期并发呼吸衰竭患者升高更加明显,较其它各组均有显著差异,患者免疫反应进一步增强。
3 COPD患者无论稳定期、急性加重期及并发呼吸衰竭患者与健康人比较CDl9<+>细胞差异无统计学意义,表明B淋巴细胞在COPD发病中的作用尚不明确。
4 CDl6<+>CD56<+>细胞(N K细胞)在COPD各组患者均有明显降低,说明COPD的发生与患者N K细胞介导的细胞免疫功能低下直接相关;随病情加重N K细胞降低更加明显,COPD并发RF患者较COPD稳定期显著性下降(P<0.01)。但COPD稳定期与急性加重期比较、急性加重期并发呼衰与未并发呼衰比较无显著差异。
5 COPD患者树突细胞CDl23<+>、CDll<+>细胞较健康人减少;急性加重期及合并呼吸衰竭患者进一步下降,较COPD稳定期及健康人有明显差异,在一定程度上反映病人免疫功能的状况。但COPD稳定期与健康人比较、急性加重期并发呼衰与未并发呼衰患者比较无明显差异。
6 COPD患者外周血LTB4水平增高,参与气道炎症过程;急性加重期及合并呼吸衰竭患者进一步升高,较COPD稳定期及健康人有明显差异, COPD并发MODS患者LTB4水平无降低。但COPD稳定期与健康人比较、急性加重期并发呼衰与未并发呼衰患者比较差异无统计学意义。
7 COPD患者综合治疗的同时,应积极改善免疫功能,有利于延缓疾病进展并改善预后,尤其对于AECOPD患者及并发RF或MODS患者。