论文部分内容阅读
本文运用3RACE，PCR及电子克隆的方法克隆得到微紫青霉菌(Penicilliumjanthinillum)菌株GXCR铜转运P-type ATPase基因cDNA。ORF大小为3720bp，编码一个1240氨基酸的蛋白质，预计分子量为132KD。Blastn发现与棒曲霉(Aspergillus clavatus)菌株NRRL 1 copper-transportingATPase同源性最高(93％)。SMART分析表明，菌株GXCR的铜转运P-type ATPase基因编码产物存在7个跨膜结构，含P-type ATPase共有的保守功能域，以及P<,1B>型P-type ATPase的特征保守基序HP，CPX，推测GXCR铜转运P-type ATPase属于P<,lB>型P-type ATPase。荧光定量PCR及Northem杂交分析发现40mM Cu<2+>明显的诱导了GXCR的铜转运P-type ATPase基因的表达，诱导30min时表达量最高，1小时后表达量开始下降，在Ag<+>和Cd<2+>诱导时表达量也有不同程度的增力口。