目的:肝纤维化是由慢性肝损伤所导致的病理改变,是慢性肝病发展到肝硬化的必经阶段。目前肝纤维化的分子机制方面尚无关键性突破研究,因此临床上也没有针对肝纤维化的有效药物。Nucleophosmin（NPM）是一种细胞内普遍表达的核仁磷酸化蛋白,在细胞增殖与存活等多种生命过程中发挥调控作用。前期实验发现肝星状细胞活化后,NPM表达上调,NPM表达量的改变影响了肝纤维化标志物的表达。本文构建了 CCL4诱导的小鼠肝纤维化模型,在动物水平上研究NPM在肝纤维化中的作用,并初步探索了 NPM在肝纤维化中的分子机制。方法:在细胞水平上,通过TGF-β1诱导肝星状细胞LX-2纤维化,检测NPM表达情况。在LX-2细胞中敲低NPM或用NPM抑制剂CIGB-300刺激细胞,Western blot检测处理后细胞内纤维化标志物的表达变化。在动物水平上,构建CCL4和CIGB-300（NPMS125磷酸化抑制剂）共处理的小鼠肝纤维化模型,通过免疫组化、免疫荧光和Western blot检测小鼠肝纤维化程度变化。机制研究中,在LX-2细胞中敲低NPM,用AKT磷酸化抑制剂MK2206或激活剂SC79刺激细胞,通过CCK8、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡及活性氧的变化,Western blot检测AKT通路相关蛋白,验证NPM通过AKT途径参与肝纤维化的分子机制。结果:TGF-β1刺激LX-2细胞后,纤维化标志物的表达升高;而在LX-2细胞中敲低NPM或CIGB-300处理后,肝纤维化标志物表达也随之降低。在CCL4和CIGB-300共处理的小鼠肝纤维化模型中发现,NPM功能抑制后,小鼠的肝损伤减轻,肝纤维化标志物表达降低。另外,CCK8实验检测到LX-2细胞中敲低NPM后,细胞增殖能力降低;AKT磷酸化抑制剂MK2206处理LX-2细胞后,细胞内活性氧水平、细胞凋亡也随之升高,肝纤维化标志物表达降低。流式细胞术检测到敲低及抑制NPM后,细胞内活性氧水平升高,细胞凋亡增多。结论:细胞实验的结果提示,NPM的表达抑制或磷酸化的抑制,会抑制肝星状细胞的增殖,促进细胞凋亡,降低肝星状细胞纤维化标志物的表达;动物实验的结果提示,NPM蛋白S125位点磷酸化的抑制,可以显著缓解肝纤维化进程;NPM对肝纤维化有促进作用,可能是通过AKT通路影响了肝星状细胞的活性氧水平和凋亡作用。上述研究结果初步阐明了 NPM促进肝纤维化的作用与分子机制,并为以NPM为靶点的肝纤维化药物研发提供了科学依据。