人颌骨组织冻存后活性评估及组织库初步建立

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目的:体外实验评估正常人颌骨冻存后的生物活性变化,初步建立颌骨组织库,探讨骨组织活性冻存后用于骨缺损修复的可能性。方法:选择15~80岁的捐献者(于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科行阻生牙拔除术等牙槽手术的患者),术中无菌条件下超声骨刀取骨。骨块处理后置于含10%二甲基亚砜(Dimethyl Sulphoxide,DMSO)的冻存保护液中无菌独立包装,行慢速梯度降温至-80℃,登记必要信息后保存入-80℃深低温冰箱,建立骨组织库。通过检测不同冻存时限(0、1、6、12个月)骨块来源的成骨系细胞爬出时间及集落形成率,形态变化,增殖活力,碱性磷酸酶合成能力,体外矿化能力,成骨相关基因表达能力,凋亡情况,染色体变异情况,细胞衰老情况等,来研究低温冻存对骨组织生物活性的影响。使用SPSS17.0软件包对数据进行统计分析。结果:不同冻存时限骨块组织块培养法均能观察到细胞爬出及集落形成,形态无明显变化;增殖活力,碱性磷酸酶合成能力,体外矿化能力,成骨相关基因表达能力,染色体变异情况,细胞衰老情况等无显著差异(P>0.05)。结论:低温冻存对人颌骨组织体外生物学功能影响甚微,冻存颌骨组织库用于自体骨缺损修复或组织工程骨构建具有可行性。
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