【摘 要】
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目的:通过观察柴胡当归散联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化代偿期患者的临床疗效。进而建立大鼠肝硬化模型,初步阐释柴胡当归散治疗肝硬化可能与调节核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（nuclear factor erythroid2-related factor-2,Nrf2/antioxidant responsive element,ARE）信号通路发挥抗氧化应激机制有关。从而丰富中医药治疗肝硬化的
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目的:通过观察柴胡当归散联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化代偿期患者的临床疗效。进而建立大鼠肝硬化模型,初步阐释柴胡当归散治疗肝硬化可能与调节核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（nuclear factor erythroid2-related factor-2,Nrf2/antioxidant responsive element,ARE）信号通路发挥抗氧化应激机制有关。从而丰富中医药治疗肝硬化的理论内涵,为临床应用中医药治疗肝硬化代偿期提供科学依据。方法:（1）临床观察:选取64例肝郁脾虚夹瘀证乙肝肝硬化患者,随机分为治疗组（n=32）和对照组（n=32）。其中对照组予恩替卡韦（E TV）治疗,治疗组在对照组的基础上,联合柴胡当归散治疗,分别在治疗3个月、6个月后,比较2组患者治疗前后中医证候评分、肝功能[丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、白蛋白（albumin,ALB）、血清总胆红素（total bilirubin,TBIL）]、肝纤四项[透明质酸（hyaluronic acid,HA）、Ⅲ型前胶原（typeⅢprocollagen,PC-Ⅲ）、IV型胶原（type IV collagen,IV-C）、层粘蛋白（laminin,LN）]、血清超氧化物岐化酶（superoxide dismutase,SOD）、肝脏硬度值（LSM）值变化。（2）动物实验:将28只SPF级SD健康大鼠进行适应性喂养7天随机分出8只健康大鼠作为空白组,其余大鼠按四氯化碳与橄榄油溶液（2:3）腹腔皮下注射肝硬化造模,造模时间8周。第8周随机选择4只大鼠处死,取其肝组织病理切片以证明肝硬化造模成功。造模成功后将其分为模型组、中药组各8只,空白组、模型组与蒸馏水灌胃,中药组予柴胡当归散混悬液灌胃。柴胡当归散混悬液、饮用水灌胃均为每日1次,从第9周初起,连续4周,至12周末。干预结束后,观察大鼠的一般情况并检测各大鼠血清ALT、AST、ALB、TBIL、SOD、还原性谷甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）;HE染色观察肝组织病理学改变及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织Nrf2、血红素加氧酶（heme oxygenase-1,HO-1）蛋白表达情况。结果:（1）临床研究:经治疗,两组患者临床综合疗效及中医证候评分较治疗前均有所改善（P＜0.05）,且治疗组总体疗效、中医证候评分均优于对照组（P＜0.05）。治疗组ALT、AST、TBIL、ALB、肝纤四项、肝脏硬度值水平低于对照组（P＜0.05）。治疗组SOD水平高于对照组（P＜0.05）。临床治疗期间内,两组患者均未见明显不良反应。（2）动物实验:1.大鼠一般情况:经干预治疗后,柴胡当归散组大鼠的精神状态、饮食、饮水、活动度、毛色等较模型组均有不同程度的改善。2.肝组织HE染色体:肝细胞排列紊乱,可见有变性坏死,假小叶形成,提示造模成功。经柴胡当归散干预后可见大鼠肝脏的纤维化、变性坏死等均有不同程度的改善。3.三组大鼠外周血ALT、AST、ALB、TBIL、SOD、GSH、MDA的数值变化:与空白组对比,模型组ALT、AST、ALB、TBIL、MDA水平升高（P＜0.05）,SOD、GSH水平降低（P＜0.05）;与模型组比较,柴胡当归散组ALT、AST、ALB、TBIL、MDA水平有所恢复,SOD、GSH水平升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。4.大鼠肝组织Nrf2、HO-1蛋白表达情况:与模型组对比,柴胡当归散组中Nrf2、HO-1有不同程度的升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:临床研究表明,恩替卡韦联合柴胡当归散可有效的降低肝郁脾虚夹瘀型乙型肝炎肝硬化患者中医证候积分,提高临床总疗效,改善氧化应激,保护肝细胞,减轻肝纤维,且安全可靠,用药时间越长,疗效越明显。动物实验方面,CCL4成功诱导的肝硬化模型大鼠,肝细胞破坏且假小叶形成,柴胡当归散不仅能恢复肝细胞功能,还能够减少肝脏组织纤维化的形成,这可能与激活了Nrf2/ARE信号通路及其下游SOD、GSH、HO-1等抗氧化酶的活性,减少氧化应激状态,发挥抗氧化机制相关。
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