RECK与MMP-2在成釉细胞瘤中的表达和意义

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目的:用RT-PCR,免疫组织化学等技术检测成釉细胞瘤、成釉细胞癌和牙源性角化囊肿中RECK、MMP-2蛋白及mRNA表达情况,初步探讨RECK和MMP—2在成釉细胞瘤中的关系及其对成釉细胞瘤生物学行为的影响。预期为临床上其侵袭的防治提供新的靶点、思路和理论基础。 方法:选1999年~2008年期间中山大学附属第二医院病理科存档石蜡包埋标本,成釉细胞瘤69例(原发45例,复发24例),其中丛状型22例,滤泡型29例,单囊型7例,棘皮瘤型4例,颗粒型3例,促结缔组织增生型4例;成釉细胞癌6例;牙源性角化囊肿16例。用EliVisionTM plus2-step免疫组织化学方法检测MMP-2、RECK蛋白在各实验组中的表达,应用Image-Pro Plus6.0软件计算阳性细胞数所占百分比,百分比计量分与染色深浅计量分之和作为判断RECK、MMP-2蛋白表达的阳性强度。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析RECK、MMP-2在各实验组中的mRNA水平,采用photoshop软件将RNA水平量化为灰度值,取其与beta-acting的灰度值的比值进行比较。 结果:⑴RECK蛋白在细胞胞浆着色,在OKC、AB和成釉细胞癌中的阳性表达率分别为:87.5%、65.0%、0%。在OKC组,囊肿上皮各层均见阳性表达;与OKC组比较,AB阳性表达率下降(P=0.044,P<0.05)。滤泡型AB中可见阳性表达主要位于中间星网状细胞胞浆,周边柱状细胞见少量表达;丛状型AB中周边细胞胞浆见少量表达,但星网状细胞未见表达;成釉细胞癌中,癌细胞阴性表达,与AB组比较,表达显著下降(P=0.010,P<0.05)。AB复发组(29.17%)与原发组(71.11%)比较,复发组RECK蛋白表达显著下降(P=0.001,P<0.01);各病理类型RECK蛋白表达差异无统计学意义。⑵MMP-2蛋白在OKC组、AB组、成釉细胞癌组细胞胞浆中均有表达,其在AB、成釉细胞癌中主要表达于肿瘤细胞基底层柱状或立方状细胞,星网状细胞少量表达;在OKC中棘细胞见少量表达,基底层柱状或立方状细胞未见表达。OKC组、AB组、成釉细胞癌组中MMP-2蛋白的阳性表达率分别为:18.75%、84.06%、100%。AB组与OKC组比较,AB组中MMP-2表达显著升高(P=0.001,P<0.01);AB组与成釉细胞癌组比较,组间差异无统计学意义。AB中,原发组与复发组阳性表达率为82.22%、87.05%,组间差异无统计学意义;各病理类型MMP-2蛋白表达差异无统计学意义。⑶RECK、MMP—2蛋白在AB组中的表达呈负相关关系(r=-0.431,P<0.001)。⑷RECKmRNA在OKC、AB组中均有表达,成釉细胞癌两例均未见表达。AB与OKC相比表达量显著下降(P=0.000,P<0.001)。成釉细胞癌例数少,未纳入组间统计。AB原发组与复发组比较,原发组RECKmRNA表达显著高于复发组(P=0.016,P<0.05);而各病理类型RECKmRNA表达差异无统计学意义。⑸MMP-2mRNA在OKC、AB、成釉细胞癌各组中均有表达。AB与OKC相比表达量显著升高(P=0.000,P<0.001);成釉细胞癌两例均见较强表达,因例数少,未进行统计分析;AB原发与复发及各病理类型间MMP-2mRNA表达差异无统计学意义。⑹RECK、MMP-2mRNA在AB中表达相关性分析,无统计学意义(P=0.093,P>0.05)。 结论:①在OKC、AB、成釉细胞癌中,RECK蛋白和mRNA表达呈下降趋势,且复发AB比原发AB RECK表达显著降低,RECK表达降低或缺失与AB的生物学行为密切相关,可能是AB发生浸润、复发和癌变的重要机制。②与OKC比较,AB和成釉细胞癌MMP-2蛋白和mRNA表达呈升高趋势,MMP—2的高表达与AB的生物学行为密切相关,可能AB浸润、复发和癌变有关。③在AB中RECK蛋白和MMP-2蛋白表达呈负相关,RECK可能通过蛋白水平调节MMP-2参与AB浸润、复发和恶变过程;对两组联合检测可作为评估AB复发和恶变的参考,同时也为AB治疗方法的研究提供一个新的线索。
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