背景及意义辅助生育技术中(ART)与妊娠率密切相关的两个因素是胚胎质量和子宫内膜容受性。近年来ART技术飞速发展,胚胎实验室技术不断改进,卵子受精率及优质胚胎率均得到很大提高,但体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的成功率仍徘徊在40-50%左右。因此,越来越多的学者开始关注如何提高子宫内膜容受性的问题。临床研究表明,子宫内膜厚度与胚胎着床率具有显著相关性。子宫内膜厚度可以反映子宫内膜的功能状态,预测子宫内膜的容受性。一定厚度的子宫内膜是胚胎植入的必要条件,是决定生育的重要因素。目前,薄子宫内膜尚无明确诊断标准,但多数文献将黄体中期子宫内膜厚度<7mm者称为薄子宫内膜。在IVF周期中薄子宫内膜患者较为常见,但其胚胎着床率较低,因此被认为是胚胎着床失败的关键因素之一。薄子宫内膜在IVF周期中意味着被迫冷冻胚胎和反复取消周期的概率增加,给患者带来了巨大的心理压力及经济负担。细胞增殖发育需要充足的养分,因此子宫内膜下丰富的血液供应是子宫内膜生长的重要条件。临床上治疗薄子宫内膜除了给予雌激素促进内膜增生外,还给予小剂量阿司匹林、枸橼酸西地那非等药物,通过改善局部血液灌注来增加子宫内膜厚度,但是治疗效果不佳,甚至有些患者对药物治疗无反应。并且这些药物在使用的同时还带来一些副作用。因此,对薄子宫内膜的治疗存在较多争议,甚至有学者不建议使用这些药物。而有的临床研究认为在IVF周期中子宫内膜厚度改变与雌激素浓度增高无关,且不同厚度内膜下血流可能并无差异。这些研究提示除雌激素及血流影响以外还存在有其它影响子宫内膜细胞增殖发育的因素。有学者通过电镜观察发现子宫内膜中存在有凋亡,并且发现凋亡小体的出现与子宫内膜周期性变化一致,提出凋亡调控子宫内膜周期性改变的观点。子宫内膜细胞增殖与凋亡失衡可能导致疾病的发生。凋亡相关因子中Bcl-2和c-kit与卵巢激素水平相关,在子宫内膜细胞增殖、凋亡过程中起到重要作用。而这些因子同时也是子宫内膜干细胞的标志物,一定程度上可以反映子宫内膜干细胞的增殖能力。这些研究为探讨薄子宫内膜的发病机制及临床治疗提出了新的理论指导。但目前尚无从细胞增殖与凋亡的角度来研究薄子宫内膜的报道。本实验通过研究郑州大学第一附属医院生殖医学中心薄子宫内膜(内膜厚度<7mm)患者增殖晚期子宫内膜中Bcl-2和c-kit的表达及相关性,为研究提高子宫内膜厚度,以改善子宫内膜容受性及辅助生殖技术妊娠率提供理论依据。目的通过检测Bcl-2和c-kit在人薄子宫内膜增殖晚期的定位与表达,阐释薄子宫内膜中Bcl-2和c-kit表达及相关性,为研究薄子宫内膜的病因,提高子宫内膜厚度,改善子宫内膜容受性及辅助生殖技术妊娠率提供理论依据。材料与方法于2012年9月至2013年1月在郑州大学第一附属医院生殖医学中心就诊并准备接受辅助生育技术的不孕症患者40例。根据子宫内膜厚度将患者分为两组：正常厚度子宫内膜组(内膜厚度>8mm,<14mm, n=20),薄子宫内膜组(内膜厚度<7mm=20),所有患者月经周期正常(28-35天),近三个月无甾体类激素使用史,宫腔镜检查正常,于增殖晚期(月经周期第11-12天)取子宫内膜组织,生理盐水冲洗后取部分投入95%酒精固定后送常规病理检查,剩余组织分为两份,一份做石蜡切片,HE染色,免疫组化法测定Bcl-2和c-kit的表达,一部分行Western blot进行定量分析。采用SPSS12.0统计学软件对实验数据进行统计学分析。结果1. Bcl-2阳性细胞呈棕褐色均质状,在增殖晚期子宫内膜腺细胞及间质细胞中表达,以腺细胞为主,位于细胞浆内。免疫组化及Western blot结果均显示在正常子宫内膜和薄子宫内膜中均检测到Bcl-2,但实验组Bcl-2在子宫内膜的相对表达量显著低于对照组。差异有统计学意义(P<0.05)。2. c-kit阳性细胞呈棕褐色或棕黄色,在子宫内膜的腺细胞胞膜和胞浆中表达,以胞膜为主,胞浆中少量表达,子宫内膜间质细胞中偶见点状表达。免疫组化及Western blot结果均显示在正常子宫内膜和薄子宫内膜中均检测到c-kit,但实验组c-kit在子宫内膜的表达显著低于对照组；差异有统计学意义(P<0.05)。3.薄子宫内膜组及正常子宫内膜组中Bcl-2与c-kit表达存在正相关关系(分别r=0.883, P=0.000; r=0.906, P=0.000)结论1.薄子宫内膜组中Bcl-2表达显著下降,说明薄子宫内膜组子宫内膜细胞凋亡抑制能力下降,可能与薄子宫内膜的发生有关。2.薄子宫内膜组中c-kit表达显著下降,说明薄子宫内膜组子宫内膜细胞增殖能力降低,可能与薄子宫内膜的发生有关。3.Bcl-2和c-kit在子宫内膜上的表达量存在正相关关系,提示二者共同影响子宫内膜细胞的增殖与凋亡,与薄子宫内膜的发生有关。