第一部分 胃癌细胞、胚胎性横纹肌肉瘤细胞及黑色素瘤细胞拟态血管生成能力及与Angiopoietin-2、Laminin5γ2、CD31关系的研究 目的:确定低分化胃癌细胞、胚胎性横纹肌肉瘤细胞及黑色素瘤细胞能否在体外形成血管生成拟态;检测Angiopoietin-2、Laminin5γ2及CD31蛋白在肿瘤细胞中的表达,探讨其在肿瘤血管生成拟态信号转导中的作用。 方法:应用三维培养技术、电子显微镜技术及特殊染色技术观察人低分化胃腺癌细胞株BGC823细胞、人胚胎性横纹肌肉瘤细胞株RD细胞及小鼠黑色素瘤细胞株B16细胞拟态血管的形成能力;应用免疫组织化学技术检测Ang2、LN-5γ2及CD31在拟态血管中的表达。 结果:(1) 人低分化胃腺癌细胞BGC823薄层胶原三维培养8天后,癌细胞部分区域逐渐消失,有大量细胞碎片出现,形成网络状环样结构;癌细胞种植入厚层胶原内生长14天后,癌细胞融解胶原基质,形成血管样空腔结构。 (2) 人胚胎性横纹肌肉瘤细胞RD薄层胶原三维培养13天后,形成分支、环状、网络样结构;种植入厚层胶原内生长14天后,肿瘤细胞降解胶原基质,形成血管样结构。 (3) 小鼠黑色素瘤细胞B16薄层胶原三维培养10天后部分细胞区域逐渐消失,基质内有大量细胞碎片出现,瘤细胞形成网络、环样结构;细胞种植入厚层胶原内生长14天后,肿瘤细胞在胶原内浸润生长、克隆性增殖,细胞坏死/凋亡,降解基质形成空