γ干扰素缓释微球的制备及对瘢痕疙瘩成纤维细胞作用研究

来源 :中国协和医科大学(北京协和医学院) 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lonlychanging
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研究目的:制备具有良好载药率和包封率的复合IFN-γ的可降解缓释微球,考察其缓释性能,并检测其对瘢痕疙瘩成纤维细胞的作用。 研究方法:采用改良的乳化法交联制备明胶缓释微球,用激光粒度分布测试仪及扫描电镜观察微球表面形态,计算微球平均粒径。ELISA法测定上清液中IFN-γ的浓度,计算IFN-γ明胶微球载药量、包封率。体外环境检测微球释放特点,以释放率和时间绘制微球释药曲线图。取新鲜瘢痕疙瘩,体外培养成纤维细胞,分别应用IFN-γ及负载相同含量IFN-γ的缓释微球作用于第3代瘢痕疙瘩成纤维细胞,同时以相同量空白微球为对照组。四甲基偶氮唑盐微量反应比色法(MTT法)测定细胞增殖情况,免疫细胞化学法分析各组细胞I型胶原蛋白表达情况。EXCEL、SPSS软件进行统计学分析。 研究结果:共制备负载IFN-γ明胶微球2批,平均粒径(51.76±1.01)μm;平均载药量(53.94±3.27)IU/mg,平均包封率(89.90±5.45)%;微球体外释放时间7天,总释放率91.35%;500IU/mlIFN-γ缓释微球对瘢痕疙瘩成纤维细胞作用5天后增殖抑制率明显高于相同含量普通IFN-γ组;普通IFN-γ组I型胶原合成较空白对照组有显著性差异,IFN-γ缓释微球组I型胶原合成较对照组有极显著性差异。 研究结论:通过改良乳化法制备出负载IFN-γ的明胶微球,载药量、包封率稳定,缓释性能良好,持续释放达1周。通过体外细胞培养实验,证实负载IFN-γ的缓释微球可以抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,减少其胶原合成。负载等量γ干扰素的缓释微球较普通IFN-γ对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖具有更强的抑制能力。
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