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冠心病作为常见的心血管疾病之一,已经严重威胁着人类身心健康。目前,心血管疾病治疗的方法主要有冠脉搭桥术、药物疗法和介入治疗。介入治疗创伤小,是心血管疾病的主要治疗方法。血管支架虽然解决了许多临床上的问题,但仍存在着支架材料生物相容性不足和引起血管损伤,从而造成再狭窄和晚期血栓等问题。目前,在支架材料表面构建多功能仿生涂层并实现快速内皮化是解决再狭窄和晚期血栓最有效途径之一。水凝胶的三维构造与细胞外基质类似,有利于微环境的构建。此外,水凝胶可以设计成随时间降解的生物材料,有利于控制血管内膜形成过程。本研究将不同浓度的多巴胺与一定浓度透明质酸制成HA-DAP水凝胶,通过一系列的材料学表征及细胞相容性评价,筛选出最优的HA-DAP水凝胶;然后对比研究两种方式装载VEGF(直接加入水凝胶中HA-DAP3-V、通过Hep/PLL纳米粒子载入HA-DAP3-NP10V),考察两种方式下对VEGF释放情况和内皮细胞的影响。在酸性条件下,用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化透明质酸羧基,再与多巴胺上氨基反应生成酰胺键,将多巴胺接枝到透明质酸上,然后将装载了VEGF的肝素/多聚赖氨酸(Hep/PLL)纳米粒子加入到透明质酸溶液中。加入高碘酸钠使酚羟基氧化为醌基交联到透明质酸链上形成水凝胶,其中高碘酸钠加入的摩尔量是接枝多巴胺摩尔量的1.5倍。从而构建出装载肝素/多聚赖氨酸的纳米粒子的HA-DAP水凝胶。通过紫外可见吸收光谱(UV-Vis)检测到多巴胺成功接枝到透明质酸上,通过扫描电镜观察水凝胶的断面形貌,通过溶胀平衡法测试水凝胶的溶胀率随多巴胺浓度的变化规律。内皮细胞粘附2小时结果显示,多巴胺反应浓度为3mg/mL的透明质酸水凝胶粘附内皮细胞数量多于其他样品。内皮细胞静态培养1天、3天结果显示多巴胺反应浓度为3mg/mL的透明质酸水凝胶促内皮细胞增殖能力优于其他样品,并且更有利于内皮细胞在凝胶表面铺展。将不同量的肝素/多聚赖氨酸纳米粒子加入到透明质酸水凝胶中,用扫描电镜观察纳米粒子在凝胶表面的分布,发现大量纳米粒子团聚在水凝胶表面,纳米粒子过多加入,团聚现象变严重。内皮细胞相容性结果显示,HA-DAP3-NP10(多巴胺反应浓度3mg/mL,100uL凝胶液中加入10uL纳米粒子溶液)内皮细胞静态培养1天、3天的数量、形态和活性优于HA-DAP3(多巴胺反应浓度为3mg/mL的透明质酸水凝胶)。通过两种方式装载VEGF(直接加入水凝胶中HA-DAP3-V、通过Hep/PLL纳米粒子载入HA-DAP3-NP10V),考察两种方式下对VEGF释放情况和内皮细胞的影响。通过Elisa试剂盒测试VEGF释放曲线,发现HA-DAP3-NP10V和HA-DAP3-V水凝胶在VEGF最终释放量和释放速率上没有较大差异。内皮细胞静态培养结果显示,HA-DAP3-NP10V促内皮细胞增殖效果略优于HA-DAP3-V。内皮细胞迁移结果显示,HA-DAP3-V促内皮细胞迁移能力略优于HA-DAP3-NP10V。综上所述,本研究构建出透明质酸水凝胶装载Hep/PLL-VEGF纳米粒子体系,并考察两种构建方式下对VEGF释放情况和内皮细胞的影响。最后得出HA-DAP3-NP10V和HA-DAP3-V水凝胶在VEGF最终释放量和释放速率上没有较大差异。HA-DAP3-NP10V和HA-DAP3-V水凝胶促内皮细胞增殖和促内皮细胞迁移能力相当。