黄粉虫体内脂类抗菌活性物质及凝集素的研究

来源 :福建师范大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:cj258399542
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通过不同溶剂:丙酮、石油醚、无水乙醇、苯、乙酸乙酯对黄粉虫幼虫和成虫匀浆物进行浸泡提取,并用5种指示菌对提取物进行抗菌效果检测,结果表明乙酸乙酯提取物抗菌效果最好。用乙酸乙酯对黄粉虫幼虫和成虫体内的抗菌物质进行提取,利用硅胶柱层析法和薄层层析法对粗提物进行分离,利用圆形纸片扩散抑菌法检测幼虫和成虫粗提物及各步纯化物对11种细菌的抗菌活性;利用菌丝生长速率法检测幼虫和成虫粗提物及各步纯化物对4种真菌的抗菌活性。结果表明:两类虫体的粗提物及各步纯化物对11种细菌和4种真菌均有显著抑菌效果,其中以乙醇洗脱组分的抑菌效果最强,对两类虫体的乙醇洗脱组分进行薄层层析,各筛选出一条抗细菌和真菌活性最强的条带,用气相色谱-质谱法(GC-MS)确定各条带的主要化学成分,并分析其抗菌机理。这些都为黄粉虫体内脂类抗菌活性物质的研究开发提供了理论依据,为寻找新型抗菌药物提供了重要来源。以11种人体及动物血红细胞检测黄粉虫幼虫、蛹、成虫提取液的凝集活力,并对其理化性质进行检测,结果显示三种虫态体内的凝集素粗品凝集活性存在差异,但都具有耐酸性、热敏感性、Zn2+、Cu2+依赖性、并且受L-鼠李糖与果糖溶液的抑制。采用(20%-30%)硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、SephacrylS-200-HR分子筛层析法对黄粉虫幼虫体内的凝集素进行纯化,经不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳显示为单一条带,SDS-PAGE测得亚基分子量为76KDa,SephacrylS-200-HR凝胶过滤层析法测得其相对分子量为238KDa。通过对黄粉虫幼虫、蛹、成虫三种虫态的凝集素粗品凝集红细胞的特性及理化性质的研究,揭示了凝集反应发生的机理。并从黄粉虫幼虫中分离纯化出凝集素,对其进行较为详细的性质分析,这些都为以后对黄粉虫体内凝集素的开发利用提供了理论基础。
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