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本研究使用荧光染料Hoechst33342,借助荧光显微镜对浮萍棘尾虫(Stylonychia lemnae),尾草履虫(Paramecium caudatum)这两种模式原生动物的无性分裂周期和营养期大小核行为进行详细的染色观察,采用α-Tubulin微管蛋白免疫荧光实验观察同时期细胞核与微管之间的关系,以明确两种纤毛虫大小核在无性分裂和营养期发生重要核事件的时间节点和详细过程,并对纤毛虫核行为进行了对比和讨论,获得重要结果如下:
1.首次完成了浮萍棘尾虫在最适温度培养下,无性分裂周期中大小核行为的完整描述。根据大核行为明确了各个时期的划分及持续时长。23℃培养条件下,无性分裂周期总耗时约为18h;间期约为9h;前期约4.5h;中期耗时约为2.5h;后期约为1.5h;末期约为0.5h。随着无性分裂进程的推移,核行动在每个时期上所花费的时间也越来越短。大核复制带的推移一般同时进行。小核分裂时间并不固定,但在中期融合大核完成分裂之前,小核总会完成第一次分裂;在无性分裂后期,分裂中的小核两端存在密集的微管颗粒定位的聚集形态,小核周围也存在丝状微管从一段发射至另一端,小核后期周围存在的微管形成典型的纺锤体结构。观察到当新核器完成分裂时,虫体外部出现分裂沟。对小核数目进行统计与观察,发现浮萍棘尾虫一般状态下2枚小核居多,3-6枚小核个体也经常出现,多小核对细胞个体的摄食、生存、活动并无影响。
2.补充了尾草履虫无性分裂周期中大小核行为的细节。并根据小核行为重新划分了各个时期及持续时长。25℃培养条件下,尾草履虫的无性分裂周期总耗时约为8.5h。间期约为2.5h;前期耗时约1h;中期耗时约为1.5h;后期耗时约2h;末期约为1h。在尾草履虫无性分裂周期中,大核周围并无明显的微管定位,属于无丝分裂。在营养期,小核两端存在密集的颗粒状微管结构,从两端发射丝状微管直达中部;前期大核进行DNA复制时,不产生复制带。增加了后期大核折叠、占据细胞大部分面积、卷曲的特征。后期小核完成分裂,分配至未来的前后仔虫位置时会产生核间管结构,小核分配完成后核间管分节断裂,消失于细胞中;末期细胞外部出现分裂沟,多数个体此时并未完成大核分裂,此类个体多借助于前后仔虫在水中不同方向的游动而断开。
1.首次完成了浮萍棘尾虫在最适温度培养下,无性分裂周期中大小核行为的完整描述。根据大核行为明确了各个时期的划分及持续时长。23℃培养条件下,无性分裂周期总耗时约为18h;间期约为9h;前期约4.5h;中期耗时约为2.5h;后期约为1.5h;末期约为0.5h。随着无性分裂进程的推移,核行动在每个时期上所花费的时间也越来越短。大核复制带的推移一般同时进行。小核分裂时间并不固定,但在中期融合大核完成分裂之前,小核总会完成第一次分裂;在无性分裂后期,分裂中的小核两端存在密集的微管颗粒定位的聚集形态,小核周围也存在丝状微管从一段发射至另一端,小核后期周围存在的微管形成典型的纺锤体结构。观察到当新核器完成分裂时,虫体外部出现分裂沟。对小核数目进行统计与观察,发现浮萍棘尾虫一般状态下2枚小核居多,3-6枚小核个体也经常出现,多小核对细胞个体的摄食、生存、活动并无影响。
2.补充了尾草履虫无性分裂周期中大小核行为的细节。并根据小核行为重新划分了各个时期及持续时长。25℃培养条件下,尾草履虫的无性分裂周期总耗时约为8.5h。间期约为2.5h;前期耗时约1h;中期耗时约为1.5h;后期耗时约2h;末期约为1h。在尾草履虫无性分裂周期中,大核周围并无明显的微管定位,属于无丝分裂。在营养期,小核两端存在密集的颗粒状微管结构,从两端发射丝状微管直达中部;前期大核进行DNA复制时,不产生复制带。增加了后期大核折叠、占据细胞大部分面积、卷曲的特征。后期小核完成分裂,分配至未来的前后仔虫位置时会产生核间管结构,小核分配完成后核间管分节断裂,消失于细胞中;末期细胞外部出现分裂沟,多数个体此时并未完成大核分裂,此类个体多借助于前后仔虫在水中不同方向的游动而断开。