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研究背景:缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)存活者可表现出精神运动发育、睡眠觉醒周期、激素分泌等多方面昼夜节律紊乱的现象。昼夜节律(circadian rhythms)是生物体对周期性出现的生存环境所做出的适应性反应,机体的许多生理活动都受到它的调节,许多疾病的发生、发展都与昼夜节律异常有关。相对于视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)的中枢性起搏调控作用,松果体作为一个神经内分泌器官,既有中枢昼夜节律振荡器的作用,又能合成褪黑素(melatonin,MLT)而发挥内分泌输出效应。在分子水平上,细胞内存在的节律振荡器是由多个钟基因(clock genes)蛋白组成的正负反馈转录-翻译调控环路,其中两个非常重要的成分就是Clock mRNA和Per mRNA。目前国内外尚未见到从钟基因方面对HIBD损伤中昼夜节律异常现象进行研究的相关报道。目的:比较HIBD模型组与对照组的新生大鼠松果体中Clock mRNA和Per2 mRNA以及CLOCK蛋白表达与血浆MLT浓度的变化,探讨钟基因表达异常在缺氧缺血性脑损伤导致的昼夜节律紊乱中可能扮演的重要角色。方法:用7日龄新生SD大鼠,随机分为两组(HIBD组36只,对照组36只)。HIBD模型按改良Levine法建立。用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、western blot和放射性免疫分析法(RIA)分别测定缺氧缺血后0、2、12、24、36、48小时松果体中Clock mRNA和Per2 mRNA以及CLOCK蛋白的表达量和血浆MLT浓度,并比较各组之间的差异。结果:1. HIBD后各时间点Clock mRNA的表达水平与相应对照组比较无统计学差异;HIBD组和对照组内部各时间点之间Clock mRNA的表达差异亦无统计学意义(p>0.05);2.对照组的Per2 mRNA表达无明显节律性,但在HIBD后24小时,Per2 mRNA表达开始下调,在36小时和48小时显著低于对照组(p〈0.01);3. CLOCK蛋白表达在HIBD后2小时和12小时有下降,24小时后渐恢复;4.外周血MLT浓度在HIBD后12小时开始下降(P〈0.01),持续至24小时,48小时恢复。结论:缺氧缺血性脑损伤对新生大鼠松果体中Clock mRNA表达的影响较小,但对Per2 mRNA和CLOCK蛋白的表达有明显抑制作用,同时降低松果体合成褪黑素的功能,此作用可能共同参与HIBD时昼夜节律紊乱的发生。