【摘 要】
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目的：研究重组腺病毒(AV)为载体的心肌浆网肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭犬离体心肌细胞收缩功能的影响。
方法：分对照组和实验组,对照组犬即假手术组
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目的：研究重组腺病毒(AV)为载体的心肌浆网肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭犬离体心肌细胞收缩功能的影响。
方法：分对照组和实验组,对照组犬即假手术组,实验组犬通过快速起搏建立犬的慢性心衰模型。通过胶原酶消化法分离犬心肌细胞,将分离的心肌细胞分为未转染组、转染EGFP组、染转EGFP+SERCA2a三组培养48小时,通过免疫印迹法检测各组心肌细胞SERCA2a蛋白表达水平,利用单细胞收缩动态边缘检测系统(IonOptix)测定即刻分离和48小时各组心肌细胞收缩功能的改变。
结果： Western blotting检测SERCA2a表达水平,与对照组心肌细胞组相比,心衰组SERCA2a蛋白表达明显降低(P<0.01),心衰组转染SERCA2a基因48小时后蛋白表达基本恢复对照组水平(P>0.05)。与对照组相比,即刻分离的心衰组的心肌细胞基础收缩(1mM)收缩幅度百分比明显降低(3.241±1.260％vs1.479±0.606％,P<0.01)；与心衰心肌细胞未转染组相比,过表达SERCA2a后心衰心肌细胞基础收缩(1mMCa2+浓度)和最大收缩(激动剂刺激)均明显改善[(1.000±0.366％vs3.339±0.907％。P<0.01)和(5.535±2.7707％vs11.233±2.574％P<0.01)]:与对照组未转染组相比,转染SERCA2a心衰心肌细胞基础收缩收缩幅度百分比恢复至对照组水平[(2.053±1.567)％vs(3.339±0.907)％,P>0.05]。
结论：慢性心衰犬的心肌细胞SERCA2a表达水平及心肌细胞收缩功能较对照犬明显下降；SERCA2a基因转导过表达能够改善心衰犬心肌细胞的收缩功能,基本能恢复至正常心肌收缩功能水平。
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