【摘 要】
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目的:通过建立兔肢体缺血再灌注损伤(Ischemia and reperfusion injury,I/RI)模型,观察甘草甜素(Glycyrrhizin,GL)对肢体缺血再灌注过程中血浆 ADMA、MDA含量的干预效应;观察甘草甜素
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目的:通过建立兔肢体缺血再灌注损伤(Ischemia and reperfusion injury,I/RI)模型,观察甘草甜素(Glycyrrhizin,GL)对肢体缺血再灌注过程中血浆 ADMA、MDA含量的干预效应;观察甘草甜素对兔缺血再灌注损伤肢体局部肌肉组织中MPO以及组织肿胀程度的影响;病理学分析甘草甜素对再灌注损伤肌肉组织肌纤维破坏的干预作用,研究甘草甜素对兔肢体缺血再灌注损伤的保护作用并初步探讨其作用机制。 方法:健康新西兰兔30只,随机数字法分为3组(n=10/组)。假手术组动物仅游离出右后肢股动脉不进行缺血损伤,术后6h测量右后肢小腿中段水平周长,再过6h后再次测量右后肢小腿中段水平周长并采集检测标本;模型组动物手术游离出兔右后肢股动脉,并用微血管夹阻断股动脉。在阻断股动脉处以下用橡皮带弹性环结扎,阻断侧支循环造成兔右后肢缺血模型,术后6h后测量右后肢小腿中段水平周长,并恢复血流造成缺血再灌注模型,于再灌注6h后再次测量右后肢小腿中段水平周长并采集检测标本;治疗组动物同模型组造成兔右后肢缺血模型,术后6h测量右后肢小腿中段水平周长并恢复血流,且在恢复血流前1h静脉注射甘草甜素(15mg/kg),再灌注6h后再次测量右小腿中段水平周长并采集检测标本。计算右后肢小腿中段水平周长减少百分比[(术后6h-术后12h)/术后6h×100%];同时切取各组动物右后肢小腿中段胫前肌及腓肠肌,并取静脉血5 ml。用全自动生化分析仪检测甘草甜素对血浆不对称二甲基精氨酸(ADMA)含量的影响、用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆丙二醛(MDA)含量变化;所有腓肠肌组织经匀浆后,按试剂盒说明测定组织髓过氧化物酶(MPO)含量变化;所有胫前肌标本制成普通病理切片(HE染色),光学显微镜放大10倍、40倍的视野下观察肌纤维组织破坏程度,并进行图文分析。 结果:治疗组与模型组、假手术组相比,血浆ADMA的含量分别为1.46±0.08、1.87±0.1、1.29±0.11(μmol/mL),模型组较假手术组高,其差异有显著性意义(P<0.01)。而治疗组经甘草甜素处理后较模型组低,但并未达到假手术组水平,其差异有显著性意义(P<0.01)。血浆MDA的含量分别为3.85±0.32、4.22±0.36、2.64±0.18(nmol/mL),模型组血浆中 MDA的含量较假手术组高,其差异有显著性意义(P<0.01)。而治疗组经甘草甜素处理后,MDA含量较模型组低(P<0.05),但并未达到假手术组水平(P<0.01),差异有统计学意义。腓肠肌MPO的含量分别为1.35±0.12、1.26±0.16、0.71±0.08(单位U/克湿片),模型组较假手术组高,其差异有统计学差异(P<0.05)。治疗组经甘草甜素处理后较假手术组高,其差异有统计学差异(P<0.05),而较模型组无改变,差异没有统计学意义(P>0.05)。右后肢小腿中段水平周长在术后12h与术后6h减少百分比分别为3.35±0.13、2.79±0.55、2.15±0.68(%),模型组较假手术组大,其差异有统计学差异(P<0.05)。治疗组经甘草甜素处理后较假手术组及模型组均大,其差异有统计学差异(P<0.05)。对所取胫前肌进行光学显微镜观察,模型组可见较多量骨骼肌横纹消失,并可见有部分骨骼肌组织纤维素样变性,血管充血,有大量单核细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞浸润,有明显的组织肥大、水肿,治疗组的上述损伤性改变轻微,甘草甜素干预能够减弱骨骼肌的改变。 结论:该实验结果提示甘草甜素对实验性肢体缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。其主要作用机制可能与减少活性氧类物质的生成、增强抗氧化能力、减轻脂质过氧化反应、保护内皮细胞功能等有关。
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