Dot-PPA-ELISA联合检测猪瘟、猪链球菌和猪巴氏杆菌抗体方法的建立

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本研究将Dot-PPA-ELISA用于联合检测猪瘟、猪链球菌、猪巴氏杆菌抗体,并进行了较大规模田问猪血清检测。试验对诊断膜片及关键材料做了细致研究,确定了联合诊断的最佳反应条件。制备的膜载抗原灵敏性高,相应血清2-10仍可检出;特异性强,不与猪其它疾病血清发生交叉反应;稳定性好:经批内三次检测10份猪血清、批间6批检测18份猪血清,T检验,P>0.05,差异不显著。膜片4℃保存7个月、室温(15-25℃)三个月灵敏性不变。试验确定1:80、1:16、1:16分别为联合检测猪瘟、猪链球菌病、猪巴氏杆菌病抗体的阳性标准。在用Dot-PPA-ELISA对206份田间猪血清检测中,检测HC抗体用IHA作对照(血清23稀释),两者符合率95%,差异不显著;检测猪链球菌抗体用微量凝集作对照(血清用原液),两者符合率84.4%,差异显著。试验结果表明诊断膜片便于运送、保存,性能稳定,重复性好;所用相关试剂可以标准化。Dot-PPA-ELISA联合检测法操作方便、快速,结果客观,易于判读,适宜于猪瘟、猪链球菌、猪巴氏杆菌免疫抗体的联合检测、疾病诊断及流行病学调查。
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