论文部分内容阅读
本课题从有形之痰角度研究脾虚和健脾药物对肺系痰证COPD模型大鼠粘液分泌的影响,并观察脾虚和健脾药物对模型大鼠免疫炎症、氧化应激、营养、细胞凋亡等指标的影响,从免疫炎症机制、氧化应激机制、营养机制、细胞凋亡等方面探讨脾虚生痰的机制,以揭示在肺系痰证中“脾为生痰之源”理论的实质,深化对其的理解与认识,为该理论指导临床实践、拓展应用范围提供新的思路和理论依据。选取48只健康Wistar大鼠,随机分为以下4组:空白对照组、COPD模型组、大黄致脾虚COPD模型组、六君子汤健脾治疗组,采用烟熏加气管滴注脂多糖的方法复制COPD模型,采用灌服大黄作为致使脾虚的方法,采用灌服六君子汤作为健脾的方法。观察指标:1.观察大鼠咳嗽,气喘,口鼻分泌物,活动状况,毛发光泽度,粪尿,食量,体重等一般情况;2.计算造模前后大鼠体重的变化;3.肺组织外观;4.酚红排泄实验观察各组大鼠气道粘液的分泌情况;5.收集支气管肺泡灌洗液并进行细胞分类计数;6.计算脾脏指数;7.观察各组大鼠HE染色的肺组织病理改变;8.采用免疫组化法测定各组大鼠粘蛋白(MUC5AC)的表达;9.放射免疫法测肺组织匀浆IL-2、TNF-α含量;10.放射免疫法测血液中丙二醛(MDA)含量;11. TUNEL法检测肺组织细胞凋亡指数。应用SPSS11.5统计软件对实验数据进行统计学处理。本实验以酚红排泄量和肺组织MUC5AC表达量作为肺内有形之痰的测量指标,以肺组织匀浆TNF-a含量和肺泡支气管灌洗液细胞分类计数作为评估肺内炎症水平的指标,以脾脏指数、肺组织匀浆IL-2含量作为评估肺部免疫状况的指标,以体重变化作为评估模型营养状况的指标。本实验研究发现,脾虚对COPD模型动物以上各指标的影响有显著差异,健脾药物六君子汤对以上各指标也有不同程度的影响。研究结果表明,COPD模型存在粘液高分泌,脾虚可进一步加重粘液高分泌,健脾中药六君子汤可显著减轻气道粘液高分泌,并且对免疫炎症指标、氧化应激指标、营养指标、细胞凋亡等指标亦有明显影响,提示脾虚和健脾中药可能通过免疫炎症机制、氧化应激机制、营养机制、细胞凋亡机制等方面影响COPD大鼠模型的气道粘液分泌。我们认为,神经机制、变态反应机制、胃食管返流、一些特殊食物等也参与了中医理论中认为的“脾脏病变可影响肺脏和肺脏痰证”这一病机变化。以上是对“脾为生痰之源”理论在肺系疾病中的实质进行的现代解读。