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间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是中胚层来源的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞,广泛存在于全身多种组织中,可在体外培养扩增,并能在特定条件下分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经细胞及胰岛样细胞等。MSCs是多能干细胞,具有“横向分化”或“跨系分化”的能力,不仅支持造血干细胞的生长,利用自身趋化性修复急性损伤,还可以在不同诱导条件下,在体外分化为多种组织细胞。MSCs具有广阔的临床应用前景,是细胞替代治疗和组织工程的首选种子细胞,是移植领域和自身性免疫疾病治疗的研究热点。本实验以小鼠肾脏间充质干细胞(kidney mesenchymal stem cells,KMSCs)为实验对象,在体外对细胞进行分离培养纯化、生物学特性研究及诱导分化研究后,将示踪剂标记好的小鼠肾脏间充质干细胞注入小鼠急性肾功能损伤的动物模型内,并得到以下研究结果:1.利用Ⅳ型胶原酶分离得到小鼠KMSCs,在体外条件下培养至26代,细胞形态起初为多边形及不规则形,3代以后逐渐统一成长梭形,集落样生长。RT-PCR鉴定结果显示,细胞阳性表达基因CD29、基因CD44、基因CD73和基因CD105,阴性表达基因CD34。免疫组织化学方法检测结果显示小鼠KMSCs阳性表达CD44、CD73、CD90及CD105表面标志物。血球仪细胞计数板记录KMSCs细胞数量,绘制细胞生长动力学曲线,KMSCs的细胞生长曲线呈现典型的“S”形,与KMSCs在体外增殖的通常规律基本吻合。KMSCs的群体倍增时间和克隆形成能力的结果表明:5代之前的细胞增殖效率不如5～20代的细胞增殖效率高,但随着细胞代次的升高,KMSCs的增殖速率下降,并最终出现停滞。此外,研究表明小鼠KMSCs能够再特定的诱导条件下分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肝样细胞及神经样细胞,通过特异性染色及RT-PCR鉴定,证明KMSCs向以上五种细胞分化成功。2.将示踪剂标记好的小鼠KMSCs注入脂多糖诱导的小鼠急性肾功能损伤模型中,分时段取血清及肾组织进行相关检测,经统计分析后得出结论,证明KMSCs确实可修复小鼠急性肾功能损伤。综上所述,本实验成功分离培养了小鼠KMSCs,并在小鼠急性肾功能损伤的动物模型上验证了KMSCs的免疫修复功能,为再生医学和器官移植医学提供了实验和理论依据。